背景[1-3]
Anti-alpha Tubulin抗體是以大腸桿菌內(nèi)重組表達的人源Alpha-Tubulin蛋白（C末端1-323氨基酸殘基）為抗原的多克隆抗體，可以特異性結(jié)合Anti-alpha Tubulin。Anti-alpha Tubulin主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等alpha Tubulin檢測實驗。
抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇（表位）和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。除兩者分子構(gòu)型高度互補外，抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸，才有足夠的結(jié)合力。
抗原抗體反應可分為兩個階段：階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的階段，此階段反應快，僅需幾秒至幾分鐘，但不出現(xiàn)可見反應；
第二階段為可見反應階段，這一階段抗原抗體復合物在適當溫度、pH、電解質(zhì)和補體影響下，出現(xiàn)沉淀、凝集、細胞溶解、補體結(jié)合介導的肉眼可見的反應，此階段反應慢，往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時。在血清學反應中，以上兩階段往往不能嚴格分開，往往受反應條件（如溫度、pH、電解質(zhì)、抗原抗體比例等）的影響。
Tubulin即微管蛋白，是細胞的一種骨架蛋白。Tubulin分為α、β、γ、δ、ε等多種tubulin，其中Alpha Tubulin和Beta Tubulin可以形成異源二聚體，是形成微管的最主要的兩種Tubulin。Alpha tubulin和Beta tubulin分子量分別為55kDa和50kDa，其實際檢測條帶均在55kDa左右。作為內(nèi)參，Beta tubulin的蛋白水平通常不會發(fā)生改變，因此被廣泛用于Western Bloting時上樣量是否一致的參照，也常被用于免疫染色觀察細胞的微管結(jié)構(gòu)。
應用[4][5]
用于TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表達與乳腺癌新輔助化療療效的初步研究
探索乳腺癌組織中TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ基本表達規(guī)律,分析其表達與新輔助化療療效的關(guān)系,探討TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ是否分別與蒽環(huán)類和紫杉類藥物耐藥相關(guān),評價二者的檢測是否可以作為制定乳腺癌個體化化療方案的預測指標。
方法選取64例女性原發(fā)性乳腺癌患者,隨機接受蒽環(huán)類+環(huán)磷酰胺或紫杉類+環(huán)磷酰胺或蒽環(huán)類+紫杉類+環(huán)磷酰胺的新輔助化療3-4周期后評價化療療效。采用免疫組化的方法,檢測化療前空心針穿刺組織標本中癌細胞TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表達,了解它們的表達與新輔助化療療效的關(guān)系,探討二者是否分別與蒽環(huán)類和紫杉類藥物耐藥相關(guān)。SPSS17.0系統(tǒng)進行統(tǒng)計分析。
結(jié)果1.在本研究人群中,TopoⅡα陽性表達率為59.38%。β微管蛋白Ⅲ陽性表達率為64.06%。
2. TopoⅡα的表達與臨床分期、新輔助化療后術(shù)后腋窩淋巴結(jié)的數(shù)目、ER、PgR、HER2和Ki67之間無相關(guān)性。β微管蛋白Ⅲ的表達與新輔助化療后術(shù)后腋窩淋巴結(jié)的數(shù)目、ER、HER2和Ki67之間無相關(guān)性,與臨床分期表達呈正相關(guān),與孕激素受體的表達呈負相關(guān)。
3.蒽環(huán)類化療藥物的化療療效與TopoⅡα的表達情況相關(guān)。TopoⅡα表達為陽性的患者在使用蒽環(huán)類藥物化療時能獲得更好的化療療效。在HER2過表達的患者中,HER2和TopoⅡα共表達者接受蒽環(huán)類藥物化療的療效更好。4.紫杉類化療藥物的化療療效與p微管蛋白Ⅲ的表達間未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。
參考文獻
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[2]Class IIIβ-tubulin expression in advanced-stage serous ovarian carcinoma effusions is associated with poor survival and primary chemoresistance[J].Human Pathology.2011(7)
[3]Predictive Markers of Tubulin-Targeting Agents in Breast Cancer[J].Shou-Ching Tang.Clinical Breast Cancer.2008
[4]Taxol Resistance Among the Different Histological Subtypes of Ovarian Cancer May Be Associated With the Expression of Class IIIβ-Tubulin[J].Tomokazu Umezu,Kiyosumi Shibata,Hiroaki Kajiyama,Mikio Terauchi,Kazuhiko Ino,Akihiro Nawa,Fumitaka Kikkawa.International Journal of Gynecological Pathology.2008(2)
[5]戴旭.TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表達與乳腺癌新輔助化療療效的初步研究[D].中南大學,2012.