介紹

VAL-CIT-PAB的中文名稱為（S）-2-（（S）-2-氨基-3-甲基丁酰胺）-N-（4-（羥甲基）苯基）-5-脲戊酰胺，分子式為C18H29N5O4。外觀為淺棕色固體。

圖一 VAL-CIT-PAB

合成

將（9H-芴-9-基）甲基（（S）-1-（（（S）-1-（（4-（羥甲基）苯基）氨基）-1-氧代-5-脲基戊烷-2-基）氨基）-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基）氨基甲酸酯（4.0g，6.65mmol）溶解在DMF（80mL）中并加入二乙胺（14mL）。將反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，得到殘余物。殘余物用二氯甲烷滴定，得到2.5g淺棕色固體VAL-CIT-PAB，定量產(chǎn)率。該化合物無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步[1]。

圖二 VAL-CIT-PAB的合成

向100 mg（0.199 mmol，1.0 eq）Fmoc-Cit PABOH 26的3.9 mL無(wú)水DMF溶液中加入318μΙ（1.6 mL/mmol 26）哌啶，在23°C下攪拌混合物3小時(shí)（TCL（CH2CI2:MeOH/9:1）Rf:0.05[Nin]），然后用10 mL甲苯稀釋混合物，減壓濃縮并與10 mL甲苯共蒸發(fā)三次。將粗制固體H2N-Cit-PABOH重新溶解在900μ干DMF中，并在23°C下與142μ（0.7956 mmol，4.0 eq）DiPEA一起加入到101 mg（0.199 mmol，1.0 eq）Fmoc-Val-OPfp在900μ干燥DMF中的溶液中。在23°C下攪拌混合物24小時(shí)（TCL（CH2CI2:MeOH/8:2）Rf:0.15[UV254，CAM]），然后加入318μ（1.6 mL/mmol 26）哌啶，并在23°C下攪拌混合物1小時(shí)。將混合物用10mL甲苯稀釋，減壓濃縮，并與10mL甲苯共蒸發(fā)三次。所得殘余物通過(guò)硅膠快速色譜法（CH2CI2:MeOH/1:0-95:5-9:1-8:2）純化，得到70mg（0.185mmol，93%）H2N-Val-Cit PABOH 27，為無(wú)定形淡黃色固體VAL-CIT-PAB[2]。

圖三 VAL-CIT-PAB的合成2

將96.3（31.8 g）溶解在二氯甲烷（650 mL）中，并向溶液中加入三氟乙酸（4.85 mL）。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。減壓濃縮溶劑，得到粗標(biāo)題化合物和4-（（S）-2-（（S，2-氨基-3-甲基丁酰胺基）-5-脲基戊酰胺基）芐基2,2,2-三氟乙酸酯的混合物。將粗物質(zhì)溶解在1∶1二惡烷/水溶液（300mL）中，并向溶液中加入氫氧化鈉（5.55g）?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)。真空濃縮溶劑，使用CombiFlash系統(tǒng)通過(guò)反相HPLC純化粗產(chǎn)物，用5-60%乙腈在含0.05%v/v氫氧化銨的水中的梯度洗脫，得到化合物VAL-CIT-PAB[3]。

圖四 VAL-CIT-PAB的合成3

參考文獻(xiàn)

[1]SOARES ,R.B. L,HURT , et al.COMPOUNDS, COMPOSITIONS, METHODS, AND USES FOR TREATING CANCER AND IMMUNOLOGICAL DISORDERS[P].US2019041486,2020-02-13.

[2]TAO ,Zhi-Fu,DOHERTY , et al.BCL XL INHIBITORY COMPOUNDS HAVING LOW CELL PERMEABILITY AND ANTIBODY DRUG CONJUGATES INCLUDING THE SAME[P].WO2015US64693,2016-06-16.

[3]KLAHN ,Philipp,BR?NSTRUP , et al.NEW TARGETED CYTOTOXIC RATJADONE DERIVATIVES AND CONJUGATES THEREOF[P].EP2018071507,2019-02-14.