背景[1-6]
Ubiquitin Rabbit Monoclonal Antibody(泛素兔單克隆抗體)是用泛素D對兔進行系統(tǒng)免疫再取出脾臟細胞賽選出只分泌單一泛素D蛋白的B淋巴細胞,再將此B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行雜交。最后制得分泌單一泛素D蛋白和無限增值的雜交細胞。泛素是一種保守的多肽單元,在泛素-蛋白酶體途徑中起重要作用。泛素存在共價連接到另一種蛋白質(zhì),或自由(未錨定)。
當共價結(jié)合時,它通過異肽鍵與靶蛋白綴合,或者作為單體(單泛素),通過遍在蛋白的不同Lys殘基連接的聚合物(多聚泛蛋白鏈)或通過泛素的引發(fā)劑Met連接的線性聚合物(線性的)多聚泛蛋白鏈)。多聚泛素鏈當與靶蛋白連接時,具有不同的功能,這取決于連接的遍在蛋白的Lys殘基:Lys-6連接可能參與DNA修復;Lys-11連接參與ERAD(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)降解)和細胞周期調(diào)節(jié);Lys-29連接參與溶酶體降解;Lys-33連接參與激酶修飾;Lys-48連接通過蛋白酶體參與蛋白質(zhì)降解。
Lys-63-連接參與內(nèi)吞作用,DNA損傷反應以及導致轉(zhuǎn)錄因子NF-κ-B活化的信號傳導過程。這種抗體與泛素反應,這是一種多肽先生的多肽。8.5kD。它與生理上存在的遍在蛋白和細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的綴合物反應。特別識別泛素化的細胞質(zhì)包涵體。5KD。它與生理上存在的遍在蛋白和細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的綴合物反應。特別識別泛素化的細胞質(zhì)包涵體。
5KD。它與生理上存在的遍在蛋白和細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的綴合物反應。特別識別泛素化的細胞質(zhì)包涵體。泛素樣蛋白質(zhì)修飾劑,其可以共價連接到靶蛋白上,并隨后以NUB1L依賴性方式導致它們被26S蛋白酶體降解??赡苁且粋€生存因素。UBA6激活的共軛能力。促進蛋白酶體亞基β-9型(PSMB9/LMP2)的表達。
通過促進泛素化的I-κ-B-α的TNF-α介導的蛋白酶體降解,調(diào)節(jié)TNF-α誘導的和LPS介導的先天免疫NF-κ-B中樞介質(zhì)的活化。TNF-α誘導的腎小管上皮細胞(RTEC)中p65核轉(zhuǎn)位所必需的。可能參與樹突細胞(DC)成熟,即未成熟樹突細胞分化成啟動T細胞反應的完全感受態(tài)抗原呈遞細胞的過程。
通過縮短有絲分裂期并在細胞周期的前中期階段損害MAD2L1的動粒定位,在長期體外培養(yǎng)和癌癥中介導有絲分裂不分離和染色體不穩(wěn)定性。當?shù)鞍酌阁w飽和或受損時,可能參與形成聚集體。以半胱氨酸蛋白酶依賴性方式介導細胞凋亡,尤其是在腎病,如多囊腎病和人類免疫缺陷病毒(HIV)相關(guān)性腎?。℉IVAN)期間的腎上皮和腎小管細胞。
應用[7][8]
泛素D兔單克隆抗體可用于泛素樣蛋白D的調(diào)控研究:
在研究泛素樣蛋白D調(diào)控乳腺癌干細胞對乳腺癌生物學行為影響的研究中用免疫組織化學染色法對乳腺癌組織行UBD染色并分析其表達情況;應用實時熒光定量法檢測乳腺癌細胞中UBD在基因水平的表達變化;運用細胞劃痕實驗、Transwell實驗探索UBD對乳腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移、化療耐藥等惡性生物學行為的影響;行Spheroid成球?qū)嶒?、實時熒光定量檢測UBD分子過表達下對乳腺癌細胞干性表型的調(diào)控情況。
結(jié)果組織學檢測發(fā)現(xiàn)UBD在乳腺癌組織中高表達,細胞學檢測發(fā)現(xiàn)UBD促進乳腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移和化療耐藥性,并促進乳腺癌細胞干性細胞群的富集及自我更新等惡性生物學過程;且UBD過表達促進了乳腺癌細胞干性相關(guān)基因CD133、CD90、Nanog、Bmi-1、ABCG2、KLF-4、Oct-4的表達(P<0.05)。
參考文獻
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