木犀草素(3,4,5,7-四羥基黃酮)是一種天然的黃酮類化合物,其結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1,因最初從木犀草科的木犀草Reseda odorata Linn.中分離出而得名[1]。從結(jié)構(gòu)中可知木犀草素是一種多酚羥基的化合物,親脂性差,由于羥基間存在分子間作用力,晶格能較高,其親水性也較差,由于其特殊的結(jié)構(gòu)導(dǎo)致其在多種溶劑中的溶解性低,對(duì)其制備、應(yīng)用均提出了一定的挑戰(zhàn)。
木犀草素具有豐富的藥理作用和極強(qiáng)的藥用價(jià)值,針對(duì)重大疾病療效確切,對(duì)人類健康的意義重大。木犀草素不僅可以抗炎、抗氧化,減少炎癥因子和過(guò)量活性氧對(duì)機(jī)體造成的傷害,保護(hù)正常的組織和細(xì)胞;保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng),減少神經(jīng)病變的發(fā)生,改善記憶力,提高認(rèn)知功能;還可以通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞增殖促進(jìn)凋亡達(dá)到抗腫瘤作用[2-10]。
木犀草素來(lái)源廣泛,存在于多種植物中,尤其廣泛存在于水果和蔬菜中。如藥用植物全葉青蘭、裸花紫珠、金銀花、馬齒莧、錦燈籠、鹿茸草、北劉寄奴等;唇形科藥材荊芥、黃芩、半枝蓮、白毛夏枯草、紫蘇、獨(dú)一味等;菊科藥材墨旱蓮、野菊花、菊花、蒲公英、洋甘菊等;蔬果中辣椒、胡蘿卜、洋薊、芹菜、甜椒、油橄欖等;農(nóng)作物中的花生殼、玉米須等[10-18]。目前木犀草素的半合成工藝、全合成工藝操作復(fù)雜,成本高;從天然植物中提取是木犀草素的獲取方式。研究創(chuàng)新有效的提取工藝成為眾多研究者的目標(biāo)[19-20]。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)木犀草素的提取純化工藝進(jìn)行了大量的研究,本文綜述了木犀草素提取工藝及純化工藝的研究進(jìn)展,旨在為后續(xù)的研究開(kāi)發(fā)提供理論基礎(chǔ)。
1 提取工藝
有關(guān)木犀草素的提取工藝可分為2大類,傳統(tǒng)提取工藝和新型提取技術(shù),其中新型工藝可分為直接提取和原料前處理后提取,前者有超聲輔助法、微波輔助法、超臨界流體萃取法、離子液體協(xié)同提取法;后者有酶輔助法和蒸汽爆破預(yù)處理法,以期獲得高收率且質(zhì)量穩(wěn)定的木犀草素。
1.1 溶劑提取法
溶劑提取法是較為傳統(tǒng)的提取方法,分為浸漬法、滲漉法、水煎法、回流提取法和連續(xù)提取法,其原理是選擇對(duì)原材料有效成分溶解度大的溶劑進(jìn)行提取。目前常應(yīng)用于木犀草素的提取方法為回流提取法,溶劑多為60%~80%甲醇或乙醇[21-23]。
在有關(guān)溶劑提取法的相關(guān)報(bào)道中,有學(xué)者采用黃荊、烏蘞莓、杜虹花、白毛夏枯草、獨(dú)一味等藥用植物提取木犀草素,提取率在1%~3%[24-28]。楊劍等[29]選用花生殼考察乙醇回流浸提木犀草素的工藝,應(yīng)用提取條件可得木犀草素含量為0.013 mg/g。與新型工藝技術(shù)相比,僅用溶劑法提取對(duì)藥材的利用率不足,尚不能達(dá)到效果。
1.2 超聲輔助法
超聲輔助法是利用聲波產(chǎn)生的高速、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)和攪拌作用,從而破壞原物料細(xì)胞結(jié)構(gòu),加速溶劑滲透作用,縮短提取時(shí)間,提高提取率。此法的優(yōu)點(diǎn)有:(1)提取效率高;(2)提取時(shí)間短;(3)提取溫度低;(4)應(yīng)用廣泛;(5)提取液雜質(zhì)較少,利于分離純化;(6)提取工藝運(yùn)行成本較低;(7)操作簡(jiǎn)易,設(shè)備維護(hù)、保養(yǎng)方便[30-34]。
Giacometti等[31]采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化了橄欖葉中木犀草素-4′-O-葡萄糖苷和其他幾種成分的超聲波輔助提取工藝,考察了不同超聲操作方式(脈沖和連續(xù))、液固比和超聲時(shí)間對(duì)各成分收率的影響。鐘方麗等[32]利用超聲法從錦燈籠宿萼中得到木犀草素含量為2.175 mg/g。張紅梅[33]選用絞股藍(lán)做類似研究得到木犀草素含量為2.437 mg/g。崔建強(qiáng)等[34]采用響應(yīng)面法對(duì)超聲提取花生殼中木犀草素進(jìn)行工藝優(yōu)化,優(yōu)化后提取率為0.43%。相較于傳統(tǒng)工藝,超聲提取自動(dòng)化高,收率可提高3~4倍,國(guó)內(nèi)現(xiàn)已擁有具有工業(yè)化應(yīng)用的超聲波提取設(shè)備,可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
1.3 微波輔助法
微波輔助提取法是一種利用微波能進(jìn)行物質(zhì)萃取的新技術(shù),該方法是通過(guò)適量的適宜溶劑在微波反應(yīng)器中從天然植物、礦物或動(dòng)物組織中提取各種化學(xué)成分,具有高效、快速、環(huán)保、應(yīng)用廣等特點(diǎn)。工藝主要影響因素為溶劑的選擇、液固比、微波輻射時(shí)間、微波輻射功率、破碎度、物料中的水分或濕度的影響、影響微波萃取(強(qiáng)化)的其他因素[35-39]。
Wang等[37]研究了微波輔助法提取牡丹莢中木犀草素和芹菜素的方法,工藝條件下可提取出151 μg/g木犀草素,此方法在提取過(guò)程中使溶劑被迅速加熱,植物物質(zhì)的細(xì)胞壁被迅速破壞,加速組分的溶解和提取。崔建強(qiáng)等[38]采用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)曲面法研究利用微波輔助法從花生殼中得到木犀草素的工藝,方案中微波時(shí)間為70 s,微波功率為1000 W,木犀草素得率為0.713%。金時(shí)等[39]利用木豆葉也做了相同研究。微波提取對(duì)提取率有較大提升,節(jié)能效果好,但進(jìn)行微波提取前需對(duì)藥材浸泡處理,綜合提取時(shí)間長(zhǎng),且大型微波提取設(shè)備尚有許多不足,提取生產(chǎn)線難以連續(xù),實(shí)驗(yàn)研究中易實(shí)現(xiàn),工業(yè)上仍需進(jìn)一步研究。
1.4 超臨界流體萃取法
超臨界流體萃取是指以超臨界流體為溶劑,從固體或液體中萃取可溶組分的分離操作。超臨界流體具有類似氣體的擴(kuò)散系數(shù)、液體的溶解力,表面張力為0,能迅速滲透進(jìn)固體物質(zhì)之中,提取其成分精華,具有高效、不易氧化、純天然、無(wú)化學(xué)污染等特點(diǎn)[40-43]。
王勝利等[42]對(duì)超臨界CO2萃取花生殼中木犀草素的工藝條件進(jìn)行響應(yīng)曲面法優(yōu)化探討,所得木犀草素提取率由乙醇回流法的51.2%提高到超臨界CO2萃取工藝的87.8%。Devequi-Nunes等[43]通過(guò)常規(guī)方法和超臨界萃取對(duì)6種不同的蜂膠提取物進(jìn)行化學(xué)表征,研究其生物活性。結(jié)果顯示對(duì)于獲得具有最高含量的抗氧化劑化合物(含木犀草素)來(lái)說(shuō),超臨界流體提取物低于乙醇提取物。超臨界法雖萃取速度較快,無(wú)溶劑殘留,可防止有害物的存在及對(duì)環(huán)境的污染,但提取設(shè)備較貴,提取率提升不明顯。
1.5 離子液體協(xié)同提取法
離子液體是指在室溫或接近室溫下呈現(xiàn)液態(tài)的、完全由陰陽(yáng)離子所組成的鹽,也稱為低溫熔融鹽。當(dāng)前研究中陽(yáng)離子主要以咪唑陽(yáng)離子為主,陰離子主要以鹵素離子和其他無(wú)機(jī)酸離子(如四氟硼酸根等)為主。其具有飽和蒸氣壓低、液程寬、溶解度強(qiáng)、可設(shè)計(jì)調(diào)節(jié)等優(yōu)良特性,可回收再利用是其成為綠色溶劑的關(guān)鍵,具有廣闊的應(yīng)用前景[44-46]。
雷永平等[46]研究利用離子液體提取刺玫果中的木犀草素和金絲桃苷,優(yōu)化工藝為70%乙醇,離子液體濃度0.45mol/L,料液比1∶25,最終得木犀草素為11.99 μg/g,使其提取率提高了36.87%。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看單純利用離子液體對(duì)提取率的提升有限,研究中可考慮與其他技術(shù)方法協(xié)同作用。
1.6 酶輔助法
酶輔助提取法的原理在于利用酶反應(yīng)具有高度專一性的特點(diǎn),選擇相應(yīng)的酶,將細(xì)胞壁的組成成分水解或降解,破壞其結(jié)構(gòu),使包裹在內(nèi)的有效成分混懸或溶于溶劑中,酶易失活,反應(yīng)條件必須溫和。此方法可顯著提高提取率,影響因素一般為酶的種類、酶解時(shí)間、溫度、pH值等[47-51]。
孟慶煥等[49]研究了從牡丹種皮中提取木犀草素的方法,選用果膠酶在溫度為45 ℃、pH 4.5的條件下酶解180 min,用80%乙醇進(jìn)行提取,其結(jié)果相較乙醇提取法提取率提高了4.3倍。熊清平等[50]利用纖維素酶輔助從花生殼中提取木犀草素,工藝與乙醇直接提取相比提取率提高2.15倍。秦梅頌等[51]利用鳳尾草做了相同研究。酶輔助法降低了溶劑用量及對(duì)環(huán)境的污染,但后續(xù)處理方法,值得進(jìn)一步研究。
1.7 蒸汽爆破預(yù)處理法
蒸汽爆破預(yù)處理是一種新興的物理預(yù)處理技術(shù),可使纖維素聚合度下降,半纖維素部分降解,木質(zhì)素軟化,橫向連結(jié)強(qiáng)度下降。同時(shí)增加其表面積和孔隙率的水平效應(yīng)導(dǎo)致增強(qiáng)酶消化纖維素的能力。研究表明此技術(shù)可使原料提取率明顯提高,該技術(shù)已廣泛應(yīng)用于油脂、糧食和中草藥等行業(yè)[52-55]。
趙鵬成等[55]利用蒸汽爆破預(yù)處理工藝提取花生殼,采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化,在爆破壓強(qiáng)為1.25 MPa,維壓時(shí)間46 s,含水率16%的條件下,木犀草素得率為0.926%,為未處理的1.9倍。電鏡掃描圖顯示,花生殼表皮層經(jīng)爆破處理后遭到破壞,使有效成分易于溶出。蒸汽爆破溫度可達(dá)160~260 ℃,對(duì)木犀草素而言其熔點(diǎn)在328~330 ℃,不易受高溫影響變性,此方法具有可行性。
1.8 協(xié)同提取法
協(xié)同提取法是指采用2種或多種方法協(xié)同提取原物料,實(shí)現(xiàn)方法的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),以期得到的提取效果。
協(xié)同提取法中方法組合多樣,在有關(guān)提取木犀草素的文獻(xiàn)中,有學(xué)者采用超聲協(xié)同微波法進(jìn)行提取,超聲協(xié)同酶法提取,離子液體協(xié)同微波輔助提取,離子液體協(xié)同超聲提取,所用原物料有錦燈籠、榼藤、花生殼、玉米須等,因材料不同,木犀草素提取率在0.1%~0.3%[56-60]。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看,協(xié)同法較傳統(tǒng)工藝在提取率上有較大提升,與新型單一方法比較效果不一,大都為正向結(jié)果,協(xié)同提取法雖操作相對(duì)復(fù)雜,但提取效率高,可優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),具有開(kāi)發(fā)研究前景。
從已有的木犀草素提取工藝的研究中不難發(fā)現(xiàn),提取植物來(lái)源眾多,而提取工藝中均有研究選取花生殼為原材料進(jìn)行木犀草素的提取,這提示花生殼作為木犀草素的提取原料具有特殊的優(yōu)勢(shì)。將以花生殼為原材料的6種工藝作以對(duì)比,見(jiàn)表1。已有文獻(xiàn)中無(wú)僅用離子液體提取花生殼的研究,不進(jìn)行列表比較。
木犀草素熔點(diǎn)328~330 ℃,沸點(diǎn)616 ℃,穩(wěn)定性較好,由于其親水親脂性差,在甲醇、乙醇中的溶解度尚可,因此已有文獻(xiàn)中雖工藝不同,但大都用含醇溶劑進(jìn)行提取。而甲醇毒性較大,使用乙醇或離子液體提取更加科學(xué)環(huán)保,適于工業(yè)生產(chǎn)。以提取率為指標(biāo),傳統(tǒng)的溶劑提取法最低,且溶劑使用量大,提取時(shí)間長(zhǎng),成本較高。超聲輔助法和超臨界流體萃取法,提取率未見(jiàn)顯著提高,但二者提取條件溫和,均可保持有效成分穩(wěn)定性,前者利用超聲波更易提取質(zhì)地堅(jiān)硬的根莖類藥材。蒸汽爆破預(yù)處理法可破壞植物藥纖維結(jié)構(gòu),有助溶出,提取率最高,適用于果殼類藥材,但工業(yè)生產(chǎn)時(shí)需要專門的爆破設(shè)備,工藝較為復(fù)雜。微波輔助提取法和酶輔助提取法較溶劑提取法,提取率有顯著性提升,微波提取法無(wú)高溫?zé)嵩?,不易糊化,使后期分離容易,提高提取質(zhì)量,但大型微波提取設(shè)備缺陷較大,管道式設(shè)備易堵塞,能量轉(zhuǎn)換效率一般,罐式設(shè)備裝機(jī)功率大,制造難度高。酶法輔助提取法具有專一性、特異性,針對(duì)木犀草素提取工藝具有一定的應(yīng)用前景。表1中協(xié)同提取法較單一方法提取率低,原因可能為所用原材料花生殼品質(zhì)不同,木犀草素含量不一,或不同方法間互有影響、操作方法不同等。
2 純化工藝
目前常用于分離純化木犀草素的方法有溶劑萃取法、膠束介質(zhì)萃取法、樹(shù)脂吸附法、高速逆流色譜法以及分子印記聚合物吸附法。前兩者可用于提取物的富集,后幾種方法可用作進(jìn)一步純化。
2.1 溶劑萃取法
溶劑萃取法的原理是利用化合物在2種互不相溶的溶劑中溶解度或分配系數(shù)不同,使化合物從一種溶劑內(nèi)轉(zhuǎn)移到另外一種溶劑中,各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大分離效率越高,經(jīng)反復(fù)萃取后可得到大部分化合物。它是從天然產(chǎn)物中獲得粗產(chǎn)品的重要方法之一,在木犀草素的分離純化研究中,一般不會(huì)僅用到此種分離手段[61-63]。
張艷[63]利用大孔吸附樹(shù)脂法初步純化富集提取物后,再利用醋酸乙酯萃取提取物進(jìn)一步精制,測(cè)得木犀草素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為86.1%,最終重結(jié)晶后質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)92.3%。但此操作中存在乳化現(xiàn)象,影響精制效果,有待進(jìn)一步改善。
2.2 膠束介質(zhì)萃取法
膠束介質(zhì)萃取是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種特殊液-液萃取分離技術(shù),此方法的基礎(chǔ)是在膠束內(nèi)各種化合物可以被增溶,它利用表面活性劑膠束水溶液的增溶性和濁點(diǎn)現(xiàn)象,改變實(shí)驗(yàn)參數(shù)引發(fā)相分離,使表面活性劑結(jié)合的疏水性物質(zhì)與親水性物質(zhì)達(dá)到理想的分離效果,從而提高回收率和預(yù)富集因子。表面活性劑作為萃取介質(zhì)具有“綠色化學(xué)”的趨勢(shì),其優(yōu)點(diǎn)是可消除對(duì)環(huán)境和健康有害物質(zhì)的生產(chǎn)和使用。與傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑相比,這種方法具有操作簡(jiǎn)便、安全、低成本、可集中溶解物等優(yōu)點(diǎn),所提取的物質(zhì)可以較為安全地用于食品、藥品或化妝品[64-68]。
Mi?ek等[67]以表面活性劑tritonx-100和水-丙酮為萃取溶劑,研究了不同條件對(duì)有效成分收率的影響,測(cè)定提取物中多為黃酮類化合物(主要是木犀草素衍生物)和酚酸類化合物,具有良好的抗自由基活性。胡玉等[68]利用此法富集分離了包括木犀草素在內(nèi)的9種成分。此方法可用于提取產(chǎn)物的前處理,但與溶劑萃取法不同的是,其只需要一定濃度的表面活性劑,使試劑用量少而萃取效率高,且對(duì)環(huán)境友好。
2.3 樹(shù)脂吸附法
樹(shù)脂吸附分離技術(shù)是采用特殊的吸附劑從提取液中選擇性地吸附有效成分,除去無(wú)效成分的一種提取精制的工藝。該方法具有操作方便、產(chǎn)品純度高、設(shè)備簡(jiǎn)單、節(jié)省能源、成本低等優(yōu)點(diǎn)。因此樹(shù)脂吸附法在中藥研究和生產(chǎn)中的應(yīng)用日益廣泛,將這種方法應(yīng)用于中藥有效成分的分離取得了相當(dāng)顯著的成果[69-72]。
王晴晴[70]進(jìn)行了大孔吸附樹(shù)脂法制備木犀草素的研究,研究篩選了8種樹(shù)脂,以樹(shù)脂對(duì)花生殼中木犀草素的吸附率和解吸率作為考察指標(biāo),篩選出NKA-9樹(shù)脂純化總黃酮和木犀草素,其吸附率達(dá)96%,解析率達(dá)95%以上。林姣[71]選用D-101樹(shù)脂考察分離條件,最終木犀草素總回收率85.1%。
2.4 高速逆流色譜法
高速逆流色譜法是一種液-液色譜分離技術(shù),廣泛應(yīng)用于中藥成分分離、生物化學(xué)、有機(jī)合成、保健食品、環(huán)境分析等領(lǐng)域。它克服了由固相載體帶來(lái)的樣品結(jié)合、失活、污染等缺點(diǎn),適用范圍廣,操作方便快捷,分離度高[72-77]。
王維娜等[74]利用醋酸乙酯將野菊花醇提物初步萃取后,利用高速逆流色譜法分離純化木犀草素和蒙花苷,得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.4%的木犀草素。趙淑杰等[75]利用此法從鹿藥中分離出質(zhì)量分?jǐn)?shù)為96.7%的木犀草素,所用溶劑體系為氯仿-甲醇-水(4∶3∶2)。潘少斌等[76]利用此法從杭白菊中得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為93.6%的木犀草苷,慶偉霞等[77]自忍冬葉中分離出質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.0%的木犀草苷。研究表明此方法分離純化效果極高,可用于工業(yè)化生產(chǎn)。
2.5 分子印記聚合物吸附法
分子印跡聚合物是具有特定位點(diǎn)目標(biāo)化合物的合成材料,它們能夠特異性地吸附到目標(biāo)分子上,擁有更高的親和力和選擇性,目前已廣泛應(yīng)用于色譜和電泳分離介質(zhì),值得注意的是近年來(lái)在醫(yī)藥領(lǐng)域可被用作選擇性吸附材料來(lái)提取許多成分。分子印跡固相萃取是一種簡(jiǎn)單、有效的從復(fù)雜基質(zhì)中分離化合物的方法,在分離過(guò)程中還可較少使用溶劑[78-83]。
Gao等[80]首次采用沉淀聚合法制備了木犀草素分子印跡納米粒子,評(píng)價(jià)了聚合物的吸附容量和選擇性,建立了從藥材提取物中選擇性提取木犀草素的新方法,對(duì)木犀草素進(jìn)行了有效的提取和富集,并去除了樣品基質(zhì)中的干擾物。樂(lè)薇等[81]研究制備了木犀草素-Zn(Ⅱ)配位分子印跡聚合物用以分離木犀草素;丁桂峰[82]制備了木犀草素-Cu(Ⅱ)配位分子印跡聚合物分離出質(zhì)量分?jǐn)?shù)為92.76%的木犀草素;高文姬[83]用此法得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為93.4%的木犀草素。實(shí)驗(yàn)表明此方法對(duì)目標(biāo)分析物具有良好的吸附能力,表現(xiàn)出許多優(yōu)點(diǎn),該方法的可行性擴(kuò)大了其應(yīng)用范圍,有望成為分析化學(xué)中一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用的提取工具。
目前木犀草素的純化工藝研究較少,除溶劑萃取法、大孔樹(shù)脂吸附法以及高速逆流色譜法有望應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)外,其他新新技術(shù)手段大都處于初級(jí)研發(fā)階段,研究數(shù)據(jù)不完善,見(jiàn)表2。
針對(duì)現(xiàn)有文獻(xiàn)進(jìn)行對(duì)比可知,溶劑萃取法富集倍數(shù)大、效率中等,可廣泛用于物料提取后的提取液初級(jí)純化,但萃取出的相似成分多,純化效果差,須協(xié)同其他的純化分離手段。膠束介質(zhì)萃取法與溶劑萃取相比都可用于提取物預(yù)富集,但前者試劑用量小、安全、環(huán)保,可提高回收率。樹(shù)脂吸附法相對(duì)其他方法近年來(lái)研究的成果多,操作較為簡(jiǎn)便,萃取效率和純化效果較高,吸附性能較穩(wěn)定,還可回收再利用,與溶劑萃取法可發(fā)揮協(xié)同作用,是優(yōu)勢(shì)較大的純化方法。高速逆流色譜法無(wú)不可逆吸附,具有樣品無(wú)損失、無(wú)污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn),可用于制備標(biāo)準(zhǔn)品,近年來(lái)已廣泛應(yīng)用于中藥分離。分子印記聚合物吸附法吸附能力強(qiáng),純化效果極佳,可特異性地吸附到目標(biāo)分子上,以排除樣品中相似的干擾成分;但其仍處于探索階段,有待進(jìn)行大量研究。
3 結(jié)語(yǔ)與展望
目前提取方法多樣,但僅憑單一提取法常常難以滿足多個(gè)目標(biāo)。超聲輔助法成本較低但收率較其他工藝提升不顯著;超臨界流體萃取法綠色無(wú)污染,但收率同樣未能顯著提高;微波輔助法不易工業(yè)化生產(chǎn);酶輔助法特異性強(qiáng),有一定應(yīng)用前景,還需考慮成本問(wèn)題;而單一使用離子液體雖綠色環(huán)保,但同樣未能使收率有較大提升;蒸汽爆破預(yù)處理法收率最高,但需要專用設(shè)備,目前難以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。綜合來(lái)看協(xié)同提取法目前研究數(shù)量雖少,所得成效尚不顯著,但思路值得日后進(jìn)一步借鑒研究,有望使各法優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),得到真正利于工業(yè)應(yīng)用的技術(shù)。從現(xiàn)有的提取純化研究中不難發(fā)現(xiàn),由于受到原材料中木犀草素含量的制約,木犀草素的提取率整體較低,傳統(tǒng)溶劑法的基礎(chǔ)上進(jìn)行與新工藝的結(jié)合,包括超聲輔助法、微波輔助、超臨界流體萃取法、酶輔助法、蒸汽爆破預(yù)處理法等方法,均在提取效率、提取效果、工藝操作便攜性上有一定的應(yīng)用價(jià)值和前景。如何減少提取溶劑,提高提取效率,是今后研究的主要方向。
近年一些新技術(shù)應(yīng)用于化合物的分離純化,取得了較好的研究進(jìn)展,如文中所提到的分子印跡聚合物吸附法、膠束介質(zhì)萃取技術(shù)等,純化方法中高速逆流色譜法與大孔樹(shù)脂法最易用于工業(yè)生產(chǎn),前者分離純度極高,可用于制備標(biāo)準(zhǔn)品,后者研究深入,材料可重復(fù)利用。其他方法雖各有環(huán)保、高效等優(yōu)勢(shì),但對(duì)木犀草素的分離仍處于探索階段,還需研究人員進(jìn)一步考察,真正應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)還有較長(zhǎng)的一段路要走。從純化的研究中可知,目前報(bào)道的純化工藝中可達(dá)到的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85.1%~98.4%,采用單純一種純化工藝也很難達(dá)到理想的純化效果,可將不同的純化技術(shù)有機(jī)結(jié)合,以精簡(jiǎn)工作流程、降低純化成本和開(kāi)拓新型純化工藝研究。就木犀草素的提取原料來(lái)講,花生殼來(lái)源廣泛,是木犀草素工業(yè)化生產(chǎn)的綠色優(yōu)勢(shì)來(lái)源,具有原料易得,成分簡(jiǎn)單,易于提取分離的優(yōu)勢(shì),值得進(jìn)一步研究其提取純化工藝。