背景[1-3]
磷酸化上皮鈉通Β抗體是可以特異性結(jié)合磷酸化上皮鈉通Β蛋白的一類多克隆抗體，主要用于磷酸化上皮鈉通Β蛋白的體外檢測實驗。
磷酸化上皮鈉通ΒELISA檢測示意圖
鈉離子通道是由內(nèi)在膜蛋白形成的離子通道，可以讓鈉離子Na通過細胞膜。鈉離子通道可以依啟動的方式加以分類，一種是依電壓變化而啟動的（電壓門控型），另一種則是需和其他化學物質(zhì)（配體）結(jié)合后才啟動的（配體門控型）。
上皮鈉通道（ENaC）是可滲透Na+離子的膜離子通道。它位于腎臟，肺，結(jié)腸和其他組織的上皮的頂質(zhì)膜中，在反式上皮Na+離子轉(zhuǎn)運中發(fā)揮作用。具體而言，通過ENaC的Na+轉(zhuǎn)運發(fā)生在許多上皮表面，并且在調(diào)節(jié)鹽和水的吸收中起關(guān)鍵作用。
ENaC由三個結(jié)構(gòu)相關(guān)的亞基組成，形成一個四聚體通道A，B和γ。隨著角質(zhì)形成細胞的分化，其A和B亞基的表達得以增強。B和γ-ENaC亞基對于浮腫液發(fā)揮其作用，對遠端肺上皮的凈液吸收發(fā)揮作用。并且已經(jīng)得出結(jié)論，這些亞基在高眼壓小鼠的視網(wǎng)膜中差異表達，因此，A-ENaC蛋白的上調(diào)可以作為針對眼內(nèi)壓升高的保護機制。
應(yīng)用[4][5]
用于腺嘌呤致大鼠慢性腎功能衰竭時腎臟上皮鈉通道和鈉鉀氯共轉(zhuǎn)運體的表達研究
腎臟維持機體水鹽代謝、酸堿平衡以及內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)主要是通過上皮鈉通道（ENaC）、鈉鉀氯共轉(zhuǎn)運體（NKCC2）和水通道蛋白（AQP2）對水鹽代謝的調(diào)控來實現(xiàn)的。
為研究慢性腎功能衰竭過程中這些蛋白的變化,本實驗通過建立腺嘌呤誘導的慢性腎功能衰竭大鼠模型,應(yīng)用形態(tài)學觀察、血尿生化檢測、免疫組織化學染色、RT-PCR和Werstern blotting等方法,觀察腎臟形態(tài)學及各生化指標的變化,腎臟主要的鈉通道NKCC2、γ-ENaC以及水通道AQP2 mRNA及蛋白水平的變化,以及NKCC2、γ-ENaC在細胞定位的改變,研究NKCC2和γ-ENaC在慢性腎功能衰竭中所起的作用和其調(diào)節(jié)機制。研究結(jié)果顯示,慢性腎功能衰竭時出現(xiàn)多尿,以及電解質(zhì)紊亂,腎小管上皮細胞NKCC2、AQP2 mRNA及蛋白水平降低,而γ-ENaCmRNA表達增多,蛋白水平卻表現(xiàn)出下降趨勢,并與功能學指標相關(guān)。
研究結(jié)果提示:慢性腎功能衰竭是由代償向失代償過度的漸進過程,腺嘌呤所致大鼠腎衰腎小管重吸收障礙先于腎小球濾過障礙。大鼠慢性腎功能衰竭時,NKCC2、γ-ENaC蛋白水平降低是導致尿量增多及血鈉降低的主要原因之一。
參考文獻
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[2]Vasopressin increases Na-K-2C1 cotransporter expression in thick ascending limb of Henle’s loop.Kim GH,Ecelbarger CA,Mitchell C,Packer RK,Wade JB,Knepper MA.American Journal of Physiology.1999
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[5]程潤芬.腺嘌呤致大鼠慢性腎功能衰竭時腎臟上皮鈉通道和鈉鉀氯共轉(zhuǎn)運體的表達[D].吉林大學,2009.