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L-瓜氨酸抗體的應(yīng)用

2020/11/27 10:35:56

背景[1-3]

L-瓜氨酸抗體是一類可以特異性結(jié)合L-瓜氨酸的多克隆抗體,主要用于體外檢測L-瓜氨酸的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。

瓜氨酸,是一種α氨基酸,名字是由首先抽取出瓜氨酸的西瓜而來。瓜氨酸是從鳥氨酸及胺基甲醯磷酸鹽在尿素循環(huán)中生成,或是透過一氧化氮合酶(NOS)催化生成精氨酸的副產(chǎn)物。

首先精氨酸會(huì)被氧化為N-羥基-精氨酸,再行氧化成瓜氨酸并釋出一氧化氮。瓜氨酸可以使人的血管獲得松弛,用于增強(qiáng)男性性功能,以及治療性功能障礙。維護(hù)建康的肺功能,提高腦力清晰度,有幫助腦神經(jīng)細(xì)胞具貯藏與調(diào)回訊息的功能。

當(dāng)瓜氨酸仍然是氨基酸時(shí),由于它不是為DNA而編碼,所以是不會(huì)在蛋白質(zhì)生物合成中嵌入蛋白質(zhì)內(nèi),不過仍然有部份蛋白質(zhì)含有瓜氨酸。

這些瓜氨酸是由勝肽精胺酸亞氨酶(PAD)所產(chǎn)生,在瓜氨化的過程中將精氨酸轉(zhuǎn)化為瓜氨酸。一般含有瓜氨酸的蛋白質(zhì)包括有人腦髓鞘堿性蛋白(MBP)、聚角蛋白微絲蛋白及一些組蛋白。如纖維素及波形蛋白能從細(xì)胞死亡及組織發(fā)炎中被瓜氨化。

患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的病人(約80%)會(huì)發(fā)展一套免疫反應(yīng)對(duì)抗帶有瓜氨酸的蛋白質(zhì)。雖然這種反應(yīng)機(jī)制的起因不明,但察覺抗體可以幫助這類病的診斷。

應(yīng)用[4][5]

用于新型疫苗佐劑硫酸軟骨素B及L-瓜氨酸佐劑效應(yīng)研究

探討硫酸軟骨素B和L-瓜氨酸兩種新型佐劑對(duì)甲型肝炎病毒(HAV)疫苗誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響。

實(shí)驗(yàn)中分別將不同劑量的硫酸軟骨素B和L-瓜氨酸與HAV疫苗HepA-1(滴度=18 EU)混合作為劑量梯度實(shí)驗(yàn)組,并設(shè)置陰性對(duì)照組Blank(生理鹽水組)、陽性對(duì)照組(HepA-118EU組)和鋁佐劑對(duì)照組(HepA-118EU+Al(OH)3300μg),經(jīng)皮下注射ICR小鼠,共免疫一次,采血4次,采血后分離血清,用ELISA法檢測小鼠血清中抗HAV抗原特異性IgG抗體水平。

在實(shí)驗(yàn)期間,對(duì)小鼠的健康狀況進(jìn)行觀察,并于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,分別取硫酸軟骨素B 65μg組、L-瓜氨酸12mg組及生理鹽水組小鼠腎臟、脾臟、肝臟、肺臟、心臟各主要器官制作病理切片進(jìn)行對(duì)比觀察。

結(jié)果顯示:①各組小鼠免疫后第4、8、12、16周,均產(chǎn)生抗-HAV IgG,硫酸軟骨素B 65μg組可長時(shí)間維持較高抗體滴度,至免疫16周后均高于陽性對(duì)照組,12、16周的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為6.857和3.354;P均<0.05);且與鋁佐劑組作用相當(dāng)。表明硫酸軟骨素B可增強(qiáng)HAV抗原特異性體液免疫應(yīng)答,具有佐劑效應(yīng),濃度為65μg/只。實(shí)驗(yàn)期間,各組小鼠均未出現(xiàn)異常。硫酸軟骨素B 65μg組小鼠腎、脾、肝、肺、心組織均未觀察到病變。

②各組小鼠免疫后第4、8、12、20周,均產(chǎn)生抗-HAV IgG,L-瓜氨酸12mg組抗體水平相對(duì)較高,第8、12周時(shí)高于陽性對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為4.811和4.072,P均<0.05),且8、12周時(shí)抗體滴度與鋁佐劑對(duì)照組相當(dāng),20周時(shí)抗體水平迅速降低。表明L-瓜氨酸可以增強(qiáng)HAV抗原特異性體液免疫應(yīng)答,具有佐劑效應(yīng),濃度為12mg/只。

參考文獻(xiàn)

[1]Suppression of the pro-inflammatory NLRP3/interleukin-1βpathway in macrophages by the thioredoxin reductase inhibitor auranofin[J].Elina Isakov,Pnina Weisman-Shomer,Moran Benhar.BBA-General Subjects.2014(10)

[2]AS04-adjuvanted virus-like particles containing multiple M2 extracellular domains of influenza virus confer improved protection[J].Yu-Na Lee,Min-Chul Kim,Young-Tae Lee,Hye Suk Hwang,Min-Kyoung Cho,Jong Seok Lee,Eun-Ju Ko,Young-Man Kwon,Sang-Moo Kang.Vaccine.2014(35)

[3]Biosynthesis and function of chondroitin sulfate[J].Tadahisa Mikami,Hiroshi Kitagawa.BBA-General Subjects.2013(10)

[4]Combination of adjuvants:the future of vaccine design[J].Mount,Koernig,Silva,Drane,Maraskovsky,Morelli.Expert Review of Vaccines.2013(7)

[5]王陳蕓.新型疫苗佐劑硫酸軟骨素B及L-瓜氨酸佐劑效應(yīng)研究[D].北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,2015.

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