簡介

星孢菌素(也稱為抗生素AM-2282)最初是從鏈霉菌Streptomyces staurosporeus中分離的天然生物堿，溶于DMSO和甲醇，它由氨基己糖和吲哚咔唑核心構(gòu)成。星孢菌素常被用作蛋白激酶C的有效抑制劑，抑制PKCα （IC₅₀=2nM）、PKCγ（IC₅₀=5nM）和 PKCη (IC50=4nM)。因星孢菌素是廣譜抑制劑，因此可以抑制很多其他蛋白激酶如PKA(IC₅₀=7nM)、p60v-src酪氨酸蛋白激酶(IC₅₀=6nM) 、PKG(IC₅₀=8.5nM)、鈣調(diào)蛋白激酶II(IC₅₀=20nM)及肌球蛋白輕鏈激酶（IC₅₀=1.3nM），其作用靶點(diǎn)是肌球蛋白輕鏈激酶、蛋白激酶C并將正常細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯于G1期檢查點(diǎn)。該藥物有松弛平滑肌、細(xì)胞毒性和調(diào)節(jié)eNOS基因表達(dá)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡如人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系和雞胚胎神經(jīng)元細(xì)胞等作用^[1]。

作用機(jī)制

星孢菌素抑制肌動蛋白平滑肌收縮的作用機(jī)制大致如下，即細(xì)胞收縮主要由肌動蛋白和肌球蛋白形成橫橋后介導(dǎo)。肌球蛋白輕鏈激酶（MLCK）是細(xì)胞收縮的關(guān)鍵分子。MLCK有C端肌球蛋白區(qū)、N端肌動蛋白區(qū)、中心處的激酶區(qū)和鈣調(diào)蛋白（CAM）區(qū)。肌球蛋白輕鏈的磷酸化會誘發(fā)肌動蛋白和肌球蛋白分子之間的相互作用。MLCK與肌球蛋白輕鏈磷酸酶（MLCPh）之間的平衡決定肌球蛋白輕鏈（MLC）的磷酸化^[1]。

提取方法

(1)向星孢菌素發(fā)酵液中加入3％珍珠巖(按發(fā)酵液體積計，Kg/L)，攪拌30±5min，板框過濾，濾液排放至污水處理站，濾餅用壓縮空氣吹干2±0.5h，收集菌渣；

(2)將菌渣用有機(jī)溶劑提取3次，每次加入4倍體積(L/Kg菌渣)的溶劑，過濾，合并濾液；

(3)濾液在一定溫度下減壓濃縮至原體積的1/30，加入等體積的溶劑、等體積的水溶液，1/3體積的萃取助劑，攪拌30±10min，靜置60±10min，分液，水相再用原體積溶劑萃取一次，合并有機(jī)層，加入5％(Kg/L)無水硫酸鈉，攪拌干燥60±10min，過濾；

(4)濾液在35±5℃下減壓濃縮至原體積的1/20～1/16，加入2倍體積的解析溶劑，常溫攪拌60±10min，過濾，得星孢菌素粗品；

(5)將星孢菌素粗品用溶劑A與溶劑B體積比為88:12～94:6的混合溶劑溶解，混合溶劑體積(L)為星孢菌素質(zhì)量(Kg)的15倍，溶解后用0.22μm的濾膜過濾。濾液在一定溫度下減壓濃縮至原體積的1/6，加入等體積的溶劑B，攪拌60±10min，過濾，得星孢菌素一次結(jié)晶品，按照此方法再結(jié)晶一次，得二次結(jié)晶品；

(6)星孢菌素二次結(jié)晶品在60±5℃真空干燥16±2h，粉碎，得星孢菌素成品^[2]。

參考文獻(xiàn)

[1]羅銀月. 星孢菌素對山羊顳下頜關(guān)節(jié)盤細(xì)胞胞外基質(zhì)及肌動蛋白骨架的影響[D]. 甘肅:蘭州大學(xué),2018. DOI:10.7666/d.D01451189.

[2]湖北宏中藥業(yè)股份有限公司. 一種星孢菌素提取方法:CN201911129828.6[P]. 2020-12-22.