概述[1]
無(wú)機(jī)焦磷酸酶（PPA）基因是植物糖代謝過(guò)程中的蔗糖合成調(diào)控基因，為將該基因運(yùn)用于甘蔗轉(zhuǎn)基因的研究，從面包酵母克隆了該基因。無(wú)機(jī)焦磷酸酶（酵母）純化自重組 E. coli 菌株，攜帶有從釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）克隆的 ppa 基因和蟾分枝桿菌（Mycobacterium xenopi）GyrA 內(nèi)含肽的融合基因。該焦磷酸酶催化無(wú)機(jī)焦磷酸鹽水解生成正磷酸鹽：P207-4 + H20 →2HP04-2。在核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中，其可解除生成的無(wú)機(jī)焦磷酸鹽對(duì)反應(yīng)體系的抑制。由 Biohelix 公司（現(xiàn)在是 Quidel 公司的全資子公司）研發(fā)。無(wú)機(jī)焦磷酸酶（英語(yǔ)：Inorganic Pyrophosphatase，簡(jiǎn)稱為焦磷酸酶）是一種催化一分子焦磷酸鹽轉(zhuǎn)化為兩分子磷酸鹽離子的酶。這是一個(gè)高放能的反應(yīng)，因此此反應(yīng)可偶聯(lián)到一些熱力學(xué)上不利的轉(zhuǎn)化，以便驅(qū)動(dòng)這些轉(zhuǎn)化進(jìn)行到完全。此酶的功能乃是在脂代謝（包括脂合成與分解）、鈣吸收以及骨形成和DNA合成中扮演重要角色，其他生物化學(xué)轉(zhuǎn)化也是如此。
組分
組分名稱
數(shù)量
Yeast Pyrophosphatase (0.1 U/μl)
100 μl/1 ml
應(yīng)用
反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中提高 RNA 產(chǎn)量。
增強(qiáng) DNA 復(fù)制。
活性定義
1 單位指標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下（20mM Tris-HCl，pH 7.5，2mM MgCl2，2mM PPi，25℃ 反應(yīng) 10 分鐘）每分鐘催化無(wú)機(jī)焦磷酸鹽生成1μmol 磷酸鹽所需的酶量。
儲(chǔ)存
-20℃可保存3年。
使用注意事項(xiàng)
（1） 該酶在多種反應(yīng)Buffer中均具有活性，通常該酶在HDA擴(kuò)增、LAMP擴(kuò)增等實(shí)驗(yàn)中，可直接接入即可。
（2） 該酶的用量在不同的實(shí)驗(yàn)中需要優(yōu)化，通常在0.05~1U/ml濃度調(diào)整。
（3） 該酶的反應(yīng)溫度為25℃，其在16~37℃均有活性，65℃ 10min可使該酶失活。
主要參考文獻(xiàn)
[1] 范海闊, 黃東杰, 劉巧泉, 等. 無(wú)機(jī)焦磷酸化酶融合基因克隆分析及表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2007, 20(6): 1267-1271.