背景及概述
甲基磺酸乙酯,是一種有機(jī)化合物,化學(xué)式為C3H8O3S,無(wú)色透明油狀液體,溶于乙醚、乙醇、氯仿,微溶于水。主要用作菌種誘變劑,也可用于有機(jī)合成和癌癥的研究。甲磺酸乙酯的臨床前研究發(fā)現(xiàn)其可直接與生物大分子發(fā)生烷基化反應(yīng),可能會(huì)導(dǎo)致 DNA 突變,致癌效應(yīng)和致畸效應(yīng)。2017年10月27日,世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)公布的致癌物清單初步整理參考,甲基磺酸乙酯在2B類致癌物清單中。
含量測(cè)定
因甲磺酸乙酯的雜質(zhì)限度要求較低,通常的色譜分析方法會(huì)面臨檢測(cè)靈敏度不夠、樣品基質(zhì)干擾以及樣品中的甲磺酸與醇類流動(dòng)相反應(yīng)生成磺酸酯干擾測(cè)定等問(wèn)題,本文對(duì)甲磺酸乙酯的測(cè)定方法,采用二氯甲烷萃取技術(shù)與 GC - MS聯(lián)用進(jìn)行研究[1]。
溶液配制
內(nèi)標(biāo)溶液:稱取甲磺酸異丙酯約 12.5 mg,置 50 mL 量瓶中,用二氯甲烷溶解并稀釋至刻度,取該溶液1.0 mL,置100 mL量瓶中,二氯甲烷稀釋至刻度(2.5μg/mL),取該溶液 10.0 mL,置 100 mL 量瓶中,二氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液:精密稱取樣品 0.2 g,加 2 mL 水溶解后,加 2mL 內(nèi)標(biāo)溶液提取,分離和轉(zhuǎn)移有機(jī)層至約含 0.2g 無(wú)水硫酸鈉的小瓶中,過(guò)濾,取續(xù)濾液,即得。
對(duì)照品溶液:精密稱取甲磺酸乙酯約 12.5mg,置 50 mL 量瓶中,用二氯甲烷溶解并稀釋至刻度(250μg/mL),取該溶液 1.0 mL,置 100 mL 量瓶中,用二氯甲烷稀釋至刻度(2.5μg/mL),取上述濃度為 2.5μg/mL 的內(nèi)標(biāo)溶液 1.0 mL,置同一 10 mL 量瓶中,用二氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,即得。
定位溶液:分別取甲磺酸乙酯、甲磺酸異丙酯濃度均為 2.5μg/mL 的溶液各 1 mL,分別置 10 mL 量瓶中,用二氯甲烷稀釋至刻度,作為定位溶液。
色譜條件
色譜條件:載氣為高純氦氣;柱流量:1.5 mL/min;分流比為 2∶1;進(jìn)樣量 1μL;采用程序升溫,起始柱溫 45℃,保持 1min,再以 10℃ /min,升到 135℃,維持 2min;進(jìn)樣口溫度為 240℃。
質(zhì)譜條件:離子源溫度為 230℃;接口溫度為 260℃;溶劑延遲時(shí)間:2.5min;檢測(cè)器電壓:調(diào)諧電壓;電子能量:70eV;掃描(檢測(cè))方式:選擇性離子檢測(cè)(SIM)。甲磺酸乙酯、異丙酯 m/z 的為 79 和 123。故在此升溫程序的基礎(chǔ)上微調(diào)升溫程序,最終溶劑峰不干擾雜質(zhì)檢測(cè),各峰之間分離度均大于 1.5。
圖1 甲磺酸乙酯色譜圖
參考文獻(xiàn)
[1]EMEA. Guidelines on the limits of genotoxic impurities[S].London:EMEA,2006.