背景^[1-3]

ANTI-CTLA4抗體是一類(lèi)可以特異性結(jié)合ANTI-CTLA4的克隆抗體，主要用于檢測(cè)ANTI-CTLA4的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。

檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中ANTI-CTLA4水平。用純化的ANTI-CTLA4抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入ANTI-CTLA4，再與HRP標(biāo)記的ANTI-CTLA4抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ANTI-CTLA4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中ANTI-CTLA4濃度。

細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原4（cytotoxic T-lymphocyte antigen 4,CTLA-4）又名CD152，是由CTLA-4基因編碼的一種跨膜蛋白，表達(dá)于活化的CD4和CD8 T細(xì)胞。CTLA-4和CD28均為免疫球蛋白超家族成員，具有高度同源性，二者與相同的配體B7-2（CD86）和B7-1（CD80）結(jié)合。

與CD28功能相反，CTLA-4與其配體B7分子結(jié)合后后產(chǎn)生抑制性信號(hào)，抑制T細(xì)胞激活，是免疫系統(tǒng)一個(gè)至關(guān)重要的“剎車(chē)”。CTLA-4是使腫瘤細(xì)胞免受T細(xì)胞攻擊的一個(gè)重要機(jī)制。因此阻斷CTLA-4的免疫效應(yīng)可刺激免疫細(xì)胞活化，大量增殖，從而誘導(dǎo)或增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)。

目前兩種靶向CTLA-4的抗體Ipilimumab和Tremelimumab在黑色素瘤、腎癌、前列腺癌、肺癌等的臨床研究已廣發(fā)開(kāi)展。Ipilimumab是全人源化單抗在肺癌治療中的Ⅱ/Ⅲ期臨床試驗(yàn)也迅速開(kāi)展。Tremelimumab也是一種人源化CTLA-4單抗，是一種IgG2抗體，目前在多種腫瘤中的臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中。

應(yīng)用^[4][5]

用于基于FIt3L基因和Anti-CTLA4抗體的抗腫瘤免疫聯(lián)合治療的實(shí)驗(yàn)研究

T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤細(xì)胞免疫在機(jī)體排斥腫瘤方面起著關(guān)鍵作用，是抗腫瘤免疫治療最重要的靶點(diǎn)。細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4（cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4，CTLA-4），是共刺激分子B7的受體，主要表達(dá)于激活的T細(xì)胞表面，與B7結(jié)合后能抑制小鼠和人的T細(xì)胞的激活，在T細(xì)胞活化中起負(fù)調(diào)節(jié)作用。

用抗CTLA4抗體阻斷CTLA-4與B7的結(jié)合，在體內(nèi)外均能促進(jìn)T細(xì)胞的增殖和活化能力，從而增強(qiáng)T細(xì)胞的免疫反應(yīng)，并能夠產(chǎn)生良好的抗腫瘤效果。另一個(gè)重要的提升T細(xì)胞抗腫瘤免疫反應(yīng)的策略是以分泌細(xì)胞因子的腫瘤細(xì)胞作為腫瘤疫苗，通過(guò)對(duì)T細(xì)胞和APC產(chǎn)生旁分泌效應(yīng)，達(dá)到抗腫瘤的目的。FL（fms-like tyrosine kinase receptor-3 ligand，fms樣酪氨酸激酶受體3配體，F(xiàn)lt3Ligand，F(xiàn)L）是一種新近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子。

在體內(nèi)外均能夠誘導(dǎo)樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）和許多造血早期干細(xì)胞的增殖和活化，是目前發(fā)現(xiàn)的最為重要的DC生長(zhǎng)因子之一。而DC是體內(nèi)一種重要的專(zhuān)職抗原提呈細(xì)胞（APC），在腫瘤抗原激發(fā)特異性免疫的過(guò)程中具有重要作用，并且荷瘤宿主DC功能一般都低下。FL可以通過(guò)促進(jìn)體內(nèi)抗腫瘤免疫效應(yīng)細(xì)胞（DC、NK細(xì)胞、CTL等）的增殖、分化和成熟，產(chǎn)生顯著的抗腫瘤效應(yīng)。

然而，對(duì)一些低免疫原性、高惡性的腫瘤，單一的免疫治療策略并不能達(dá)到理想的抗腫瘤效果。而且，目前關(guān)于anti-CTLA4抗體的抗腫瘤機(jī)制還未徹底明了，存在著一些不同的認(rèn)識(shí)。

為此研究了anti-CTLA4抗體與FL瘤苗和B7瘤苗間可能存在的協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步探討了anti-CTLA4抗體的抗腫瘤作用機(jī)制，以期為肝癌及其他低免疫原性腫瘤的臨床免疫和基因治療提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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