背景^[1-6]

circRNA定量PCR檢測(cè)服務(wù)是用染料法或Taqman探針法對(duì)circRNA進(jìn)行Real Time PCR定量測(cè)定，技術(shù)靈敏度高、線性范圍寬、特異性好、重復(fù)性佳。同時(shí)，可根據(jù)客戶需求及實(shí)驗(yàn)需要為客戶提供一體化circRNA熒光定量技術(shù)服務(wù)，客戶只需要提供保存完好的組織或細(xì)胞樣本，完成circRNA熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)操作和數(shù)據(jù)分析，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，可與節(jié)省大量的時(shí)間和精力。

環(huán)狀RNA（circRNA）是目前生命科學(xué)領(lǐng)域新興的研究熱點(diǎn)分子之一。與傳統(tǒng)的線型RNA不同，環(huán)狀RNA分子呈封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)，不受RNA外切酶影響，表達(dá)更穩(wěn)定，不易降解。環(huán)狀RNA由特殊的選擇性剪切產(chǎn)生，大量存在于真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，具有一定的組織、時(shí)序和疾病特異性。環(huán)狀RNA的這些特征都表明，這種分子有巨大潛力成為新的疾病診斷標(biāo)志物。這使得環(huán)狀RNA在作為新型臨床診斷標(biāo)記物的開發(fā)應(yīng)用上具有明顯優(yōu)勢(shì)。環(huán)狀RNA（circular RNA，circRNA）是最近發(fā)現(xiàn)的一類特殊的非編碼RNA，它大量存在于真核細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，主要由pre-mRNA通過可變剪切加工產(chǎn)生。

近年研究發(fā)現(xiàn)，circRNA具有很多重要的調(diào)控功能，例如，環(huán)狀RNA分子富含miRNA結(jié)合位點(diǎn)，可以作為競爭性內(nèi)源RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）結(jié)合胞內(nèi)miRNA，在細(xì)胞中起到miRNA海綿的作用，能阻斷或降低miRNA對(duì)靶基因的抑制作用，從而促進(jìn)靶基因的表達(dá)；這一作用機(jī)制被稱為競爭性內(nèi)源RNA機(jī)制。2013年在同一期《自然》雜志上，科學(xué)家證明了環(huán)狀RNA分子具有的miRNA海綿效應(yīng)。

除此以外，circRNA也具有調(diào)控其他類型RNA、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性等功能。circRNA在不同物種中具有保守性，而且存在組織表達(dá)差異，且circRNA的環(huán)狀結(jié)構(gòu)對(duì)RNase不敏感，導(dǎo)致它比線性RNA更為穩(wěn)定，這些特性使得circRNA具有開發(fā)疾病新型診斷與治療方法的巨大潛力，研究意義重大。

應(yīng)用^[7][8]

circRNA定量PCR檢測(cè)服務(wù)可作為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎合并冠心病生物標(biāo)志物的篩選、驗(yàn)證及臨床應(yīng)用研究中：

circRNA是一類由mRNA 3’和5’末端首尾相連形成的無蛋白編碼功能的RNA分子,主要由前體RNA(pre-mRNA)通過可變剪切加工產(chǎn)生,circRNA廣泛存在于所有真核生物中,并且非常穩(wěn)定,其主要有3個(gè)功能,包括:充當(dāng)miRNA“海綿”(circRNA通過吸附miRNA來抑制其功能)、調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄或剪接、與RNA結(jié)合蛋白相互作用。最新的研究表明circRNA在疾病的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮著十分重要的作用,其具有獨(dú)特的閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu),使得其對(duì)核酸酶不敏感,比線性RNA更為穩(wěn)定,在人類疾病可作為新的潛在介質(zhì)和臨床診斷標(biāo)志物。

circRNA通過直接或間接影響miRNA表達(dá),導(dǎo)致mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)失調(diào),也可以直接影響蛋白質(zhì)表達(dá)。一些研究顯示:circRNA在腫瘤、糖尿病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病和動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生過程中起到非常重要的作用。利用基因芯片技術(shù),對(duì)來自不同細(xì)胞系和組織中的circ RNA表達(dá)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析,能夠鑒定出在一些特定組織和細(xì)胞中特異性表達(dá)的circRNA。

目前,科學(xué)家們己成功將circ RNA芯片應(yīng)用于肺組織、大腦組織、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、胰腺癌、細(xì)胞等的研究,找到相應(yīng)circRNA特異性表達(dá),并且circRNA在監(jiān)測(cè)癌癥手術(shù)后的復(fù)發(fā)方面己取得一些成果。因此,circRNA的表達(dá)變化與許多疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),可能成為多種疾病無創(chuàng)診斷的高特異性和高敏感性標(biāo)志物。近年來的流行病學(xué)資料提示:與普通人群相比,心血管疾病,尤其冠心病(coronary heart disease,CHD)在RA患者中的發(fā)生率明顯升高,增加近50%～60%。

對(duì)于病史超過10年的RA患者心肌梗死發(fā)病率增加3.1倍,提示CHD可能是RA的嚴(yán)重并發(fā)癥之一。RA是心血管疾病的一種獨(dú)立危險(xiǎn)因素,然而長期以來,RA并發(fā)CHD尚未引起臨床足夠重視,RA患者的壽命明顯縮短。有關(guān)RA和心血管疾病之間確切的發(fā)病機(jī)制仍不清楚,需要更多的醫(yī)學(xué)研究來提高我們對(duì)這方面問題的認(rèn)識(shí)。

增強(qiáng)對(duì)RA患者并發(fā)心血管疾病的警惕,及早對(duì)RA患者進(jìn)行心血管疾病的篩查,降低其心血管疾病發(fā)生率,提高RA患者生存周期,已成為一項(xiàng)重要課題,需要進(jìn)一步探索研究。尋求一種血漿標(biāo)志物能夠準(zhǔn)確有效地預(yù)測(cè)和及早發(fā)現(xiàn)RA患者的CHD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),在預(yù)防RA并發(fā)CHD的發(fā)生、發(fā)展方面,具有重要的臨床價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。

參考文獻(xiàn)

[1]Chronic myeloid leukemia-advances in biology and new approaches to treatment.Goldman JM,Melo JV.New England Journal of Medicine,The.2003

[2]Five-year follow-up of patients receiving imatinib for chronic myeloid leukemia.Druker Brian J,Guilhot Fran?ois,O’Brien Stephen G,Gathmann Insa,Kantarjian Hagop,Gattermann Norbert,Deininger Michael W N,Silver Richard T,Goldman John M,Stone Richard M,Cervantes Francisco,Hochhaus Andreas,Powell Bayard L,Gabrilove Janice L.The New England Quarterly.2006

[3]Mechanisms of BCR-ABL in the pathogenesis of chronic myelogenous leukaemia.Ren Ruibao.Nature reviews.Cancer.2005

[4]Front-line and salvage therapies with tyrosine kinase inhibitors and other treatments in chronic myeloid leukemia.Cortes Jorge,Hochhaus Andreas,Hughes Timothy,Kantarjian Hagop.Journal of clinical oncology:official journal of the American Society of Clinical Oncology.2011

[5]Activity of a specific inhibitor of the BCR-ABL tyrosine kinase in the blast crisis of chronic myeloid leukemia and acute lymphoblastic leukemia with the Philadelphia chromosome.Druker B J,Sawyers C L,Kantarjian H,et al.New England Journal of Medicine,The.2001

[6]Elevated AF1q expression is a poor prognostic marker for adult acute myeloid leukemia patients with normal cytogenetics.CJ Strunk,U Platzbecker,C Thiede,M Schaich,T Illmer,Z Kang,P Leahy,C Li,X Xie,MJ Laughlin,HM Lazarus,SL Gerson,KD Bunting,G Ehninger,W Tse.American journal of hematology.2009

[7]A novel gene,AF1q,fused to MLL in t(1;11)(q21;q23),is specifically expressed in leukemic and immature hematopoietic cells.Tse W,Zhu W,Chen H S,Cohen A.Blood.1995

[8]潘麗.血漿circRNA作為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎合并冠心病生物標(biāo)志物的篩選、驗(yàn)證及臨床應(yīng)用研究[D].南方醫(yī)科大學(xué),2018.