背景^[1-3]

ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞是一種人涎腺腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma)的常用細(xì)胞系。該細(xì)胞系來源于一位患有涎腺腺樣囊性癌的男性患者，被廣泛用于研究該疾病的生物學(xué)特性、診斷和治療等方面。

ACC-2細(xì)胞系具有高度增殖能力和侵襲性，能夠迅速生長并形成腫瘤組織。其特點(diǎn)是含有大量的黏液產(chǎn)生器和分泌型囊性結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)可以產(chǎn)生大量黏液，使得腫瘤組織在病理學(xué)上呈現(xiàn)出典型的囊性特征。此外，ACC-2細(xì)胞系還表達(dá)多種與涎腺腺樣囊性癌相關(guān)的分子標(biāo)志物，如CK20、CEA等。

ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞

由于ACC-2細(xì)胞系具有較高的研究價(jià)值，因此在醫(yī)學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用。例如，研究人員可以通過培養(yǎng)ACC-2細(xì)胞系來研究涎腺腺樣囊性癌的生長機(jī)制、病理學(xué)特點(diǎn)以及治療方法等方面的問題。此外，ACC-2細(xì)胞系還可以用于疫苗研發(fā)、藥物篩選等領(lǐng)域。

ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代及凍存操作的簡要介紹：

1.ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞培養(yǎng)基：

通常使用DMEM/F12培養(yǎng)基，其中包括葡萄糖、氨基酸、維生素和動(dòng)物血清等成分。需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。

2.ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞來源：

ACC-2細(xì)胞可以從臨床樣本中獲得，如腫瘤組織或血液樣本等。在獲取細(xì)胞時(shí)需要注意采取合適的處理方法，以避免污染和損失。

3.ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞培養(yǎng)：

將采集到的ACC-2細(xì)胞加入到含有適當(dāng)濃度的生長因子的DMEM/F12培養(yǎng)基中，然后將其放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。通常情況下，細(xì)胞會(huì)在24-48小時(shí)內(nèi)開始貼壁生長，并逐漸形成單層細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到一定程度時(shí)，可以進(jìn)行傳代操作。

4.ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞傳代操作：

當(dāng)細(xì)胞密度過高時(shí)，需要進(jìn)行傳代操作。具體步驟如下：

(1)先將培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行消化，使其脫離原有的基質(zhì)。

(2)待細(xì)胞完全脫離后，輕輕吹散成單個(gè)細(xì)胞，再加入新的培養(yǎng)基中進(jìn)行重新培養(yǎng)。通常情況下，每次傳代的比例為1:3或1:6。

(3)傳代后的細(xì)胞需要再次進(jìn)行24-48小時(shí)的培養(yǎng)才能恢復(fù)到正常的生長狀態(tài)。

5.ACC-2細(xì)胞系人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞凍存操作：

當(dāng)需要長期保存ACC-2細(xì)胞時(shí)，可以進(jìn)行凍存操作。具體步驟如下：

(1)將處于穩(wěn)定生長狀態(tài)的ACC-2細(xì)胞收集到離心管中。

(2)加入適量的冷凍保護(hù)劑(如DMSO),使細(xì)胞重懸液中的冰點(diǎn)降低至-80°C以下。

(3)將細(xì)胞重懸液轉(zhuǎn)移到凍存管中，并標(biāo)記好相關(guān)信息(如日期、批次號(hào)等)。

應(yīng)用^[4-5]

ACC-2細(xì)胞系|人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞可以用于三氧化二砷對(duì)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞p53基因表達(dá)的影響

研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As203)對(duì)腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)細(xì)胞株ACC-2細(xì)胞p53基因表達(dá)的影響,探討其誘導(dǎo)腺樣囊性癌細(xì)胞凋亡可能的分子機(jī)制。

方法：體外培養(yǎng)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞,給予指數(shù)生長期的細(xì)胞不同濃度(1.0、2.0、4.0、8.0μmol/L)的As2O3溶液和RPMI-1640培養(yǎng)液作為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。給藥后繼續(xù)培養(yǎng)24h、48h,觀察不同濃度As2O3對(duì)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞的生長抑制作用,應(yīng)用免疫組化和RT-PCR檢測p53蛋白和基因的表達(dá)變化。

結(jié)果1.As2O3對(duì)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞生長的抑制作用與時(shí)間、劑量相關(guān)。As2O3處理24h后ACC-2細(xì)胞形態(tài)無明顯變化,處理48h后ACC-2細(xì)胞縮小變圓、細(xì)胞間隙增大、細(xì)胞核分裂相減少,且抑制作用隨濃度的增加而增大。

2. 腺樣囊腺癌ACC-2細(xì)胞p53蛋白在各組中均呈陽性表達(dá),不同濃度As2O3處理p53蛋白表達(dá)量差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),不同處理時(shí)間p53蛋白表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),除1μmol/L與2μmol/L As2O3處理組比較無明顯差別(P>0.05)外,其余不同濃度組兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3. 腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞p53mRNA第123位點(diǎn)存在C→A的點(diǎn)突變,不同濃度、處理時(shí)間測序結(jié)果相同。不同濃度、處理時(shí)間p53mRNA表達(dá)量差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),不同濃度組兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

結(jié)論：三氧化二砷能夠下調(diào)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞中突變型p53mRNA及蛋白的表達(dá),可能是三氧化二砷誘導(dǎo)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞凋亡的機(jī)制。

參考文獻(xiàn)

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