背景[1][2][3][4][5][6]
瓜氨酸（L-Citrulline）是一種α- 氨基酸。從它在1914年由古賀和大岳首次分離。最終由Wada在1930年確定。它是尿素循環(huán)中的關(guān)鍵中間體，哺乳動物通過將氨轉(zhuǎn)化為尿素來排泄氨的途徑。瓜氨酸也是作為副產(chǎn)品生產(chǎn)的酶生產(chǎn)的一氧化氮從氨基酸精氨酸，通過催化的一氧化氮合成酶。
瓜氨酸是由鳥氨酸和氨基甲酰磷酸酯在尿素循環(huán)中的一個中心反應(yīng)中制成的。它也由精氨酸產(chǎn)生，作為NOS家族催化的反應(yīng)的副產(chǎn)物（NOS; EC 1.14.13.39）。它是由精氨酸通過內(nèi)根鞘和毛囊髓質(zhì)中的三氯化萘酶 制成的。首先將精氨酸氧化成N-羥基 - 精氨酸，然后將其進一步氧化成瓜氨酸，同時釋放一氧化氮。由于翻譯后修飾，幾種蛋白質(zhì)含有瓜氨酸。
這些瓜氨酸殘基由稱為肽基精氨酸脫亞胺酶（PAD）的酶家族產(chǎn)生，其在稱為瓜氨酸化或去除的過程中將精氨酸轉(zhuǎn)化為瓜氨酸。通常含有瓜氨酸殘基的蛋白質(zhì)包括髓鞘堿性蛋白（MBP），聚絲蛋白和幾種組蛋白，而其他蛋白質(zhì)如纖維蛋白和波形蛋白在細(xì)胞死亡和組織炎癥期間易受瓜氨酸化。循環(huán)瓜氨酸濃度是腸功能的生物標(biāo)志物。
臨床應(yīng)用[7]
L-Citrulline (NO中間體)可作為佐劑應(yīng)用在小鼠體液免疫效果研究中將不同劑量的硫酸軟骨素B和L-瓜氨酸與HAV疫苗HepA-1(滴度=18 EU)混合作為劑量梯度實驗組,并設(shè)置陰性對照組Blank(生理鹽水組)、陽性對照組(HepA-118EU組)和鋁佐劑對照組(HepA-118EU+Al(OH)3300μg),經(jīng)皮下注射ICR小鼠,共免疫一次,采血4次,采血后分離血清,用ELISA法檢測小鼠血清中抗HAV抗原特異性IgG抗體水平。
在實驗期間,對小鼠的健康狀況進行觀察,并于實驗結(jié)束后,分別取硫酸軟骨素B 65μg組、L-瓜氨酸12mg組及生理鹽水組小鼠腎臟、脾臟、肝臟、肺臟、心臟各主要器官制作病理切片進行對比觀察。結(jié)果顯示：①各組小鼠免疫后第4、8、12、16周,均產(chǎn)生抗-HAV IgG,硫酸軟骨素B 65μg組可長時間維持較高抗體滴度,至免疫16周后均高于陽性對照組,12、16周的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t值分別為6.857和3.354；P均<0.05)；且與鋁佐劑組作用相當(dāng)。表明硫酸軟骨素B可增強HAV抗原特異性體液免疫應(yīng)答,具有佐劑效應(yīng),濃度為65μg/只。
實驗期間,各組小鼠均未出現(xiàn)異常。硫酸軟骨素B 65μg組小鼠腎、脾、肝、肺、心組織均未觀察到病變。②各組小鼠免疫后第4、8、12、20周,均產(chǎn)生抗-HAV IgG,L-瓜氨酸12mg組抗體水平相對較高,第8、12周時高于陽性對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t值分別為4.811和4.072,P均<0.05),且8、12周時抗體滴度與鋁佐劑對照組相當(dāng),20周時抗體水平迅速降低。表明L-瓜氨酸可以增強HAV抗原特異性體液免疫應(yīng)答,具有佐劑效應(yīng),濃度為12mg/只。
但作用時間不如鋁佐劑長。實驗期間,各組小鼠均未出現(xiàn)異常。L-瓜氨酸組小鼠腎、脾、肝、肺、心組織均未觀察到病變。實驗顯示硫酸軟骨素B和L-瓜氨酸均可增強HAV抗原誘導(dǎo)小鼠的體液免疫應(yīng)答,都具有成為新型疫苗佐劑的潛質(zhì)。
參考文獻
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7. 新型疫苗佐劑硫酸軟骨素B及L-瓜氨酸佐劑效應(yīng)研究[D]. 王陳蕓.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 . 2015