背景及概述^[1][2]

膽酸是存在于膽汁中具有類固醇結(jié)構(gòu)的有機(jī)酸，為膽汁酸的成分之一，又稱CholaticAcid，在肝臟中形成是32，72，122-三羥基膽烷酸，常同一些氨基化合物(如?；撬?，甘氨酸等)結(jié)合存在于動(dòng)物膽汁中，具有乳化脂肪及促進(jìn)脂肪消化和吸收的作用。由乙醚中得正交晶體或由稀乙醇中得結(jié)晶(一水合物)?？扇苡诖?、醚、丙酮、氯仿及乙酸。以?；悄懰?、甘氨膽酸的形式存在于哺乳動(dòng)物、魚類、兩棲動(dòng)物及爬蟲類的膽內(nèi)。

可與正十六醇、棕櫚酸、硬脂酸、硬脂炔酸、巴西烯酸、廿二碳-13-炔酸等形成二元共熔物。在稀乙酸或碳酸氫鈉溶液中與溴作用得3，7，12-三羰-5β-膽烷-24-酸(去氫膽酸)。在乙酸中用乙酰氯?；?2α-羥基-3α，7α-二乙酰氧基-5β-膽烷-24-酸，與稀鹽酸或在乙酸中與稀鹽酸作用呈藍(lán)紫色，其濃硫酸溶液為橙紅色并有綠色熒光。最重要的兩種膽酸為鵝去氧膽酸和熊脫氧膽酸。

其中鵝去氧膽酸(鵝脫氧膽酸)于1924年由Adolf Windaus和Heinrich Wieland從鵝膽和人膽中分離出來。Gottingen大學(xué)的Hans Lettre闡明了它的完整結(jié)構(gòu)。1968年，波士頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院的William Admirand和Donald Small證明患膽結(jié)石的患者膽汁中都是飽和膽固醇，有時(shí)甚至出現(xiàn)微晶，而在正常人中卻不是這樣的。此后發(fā)現(xiàn)，患膽結(jié)石的患 者中的膽酸和鵝脫氧膽酸的膽汁水平比正常人中的低。

Leslie Thistle和John Schoenfield在明 尼蘇達(dá)Rochester的Mayo診所，給患者口服膽鹽，4個(gè)月后，發(fā)現(xiàn)鵝脫氧膽酸減少了膽汁中的膽 固醇量。這引起了美國(guó)的國(guó)際合作研究，該研究證明鵝脫氧膽酸引起患者中膽結(jié)石的消化。

但是，最近腹腔鏡膽囊切除術(shù)和內(nèi)窺鏡檢查術(shù)的發(fā)展，減少了鵝脫氧膽酸和熊脫氧膽酸在治療膽石 病的應(yīng)用。熊脫氧膽酸是一種鵝脫氧膽酸的代謝產(chǎn)物，日本的研究者對(duì)其進(jìn)行了研究。1927年，在Okayama大學(xué)的Shoda從熊膽汁中分離出熊脫氧膽酸，是一種長(zhǎng)期使用于日本民間的利膽 藥。由Iwasaki闡明了它的結(jié)構(gòu)。研究證明它的效用是鵝脫氧膽酸的4倍，并對(duì)膽結(jié)石患者有相似的作用。

規(guī)格^[3]

片劑： 0.25g。

用法用量^[3]

口服，0.25g，tid。

應(yīng)用^[1][4]

臨床上用于因膽汁分泌不足而引起的疾病，對(duì)肝炎也有一定的療效。膽酸 經(jīng)氧化后生成去氫膽酸，可治療膽道炎、膽結(jié)石等癥。用于膽囊炎、膽管炎、膽汁缺乏及膽道瘺管長(zhǎng)期引流者。

膽酸作為藥物載體具有兩方面的應(yīng)用：一是利用了膽酸在小腸中的高效率回收作用提高藥物的口服利用度。二是利用膽酸可被肝細(xì)胞 NTCP 攝入及小腸細(xì)胞 ASBT 重新吸收，提高藥物的肝腸靶向性。另外，利用了膽酸兩性分子的優(yōu)勢(shì)，可有助于提高藥物對(duì)于細(xì)胞膜的滲透性。

1）利用膽酸提高藥物口服利用度：膽酸作為口服藥物載體，可提高藥物口服利用度及在小腸中的穩(wěn)定性，加巴噴丁 ( gabapentin) 是一種抗焦慮型藥物，但它在口服過程中吸收率低和易水解，有人設(shè)計(jì)合成5 種與膽酸載體偶聯(lián)的加巴噴丁衍生物，靶點(diǎn)為 ASBT，實(shí)驗(yàn)表明，單價(jià)陰離子型化合物具有較好的 ASBT 靶向功能，雙陰離子型合物具有一般的 ASBT 親和力。

體外分析實(shí)驗(yàn)表明，加巴噴丁偶聯(lián)膽酸后，其在體內(nèi)的穩(wěn)定性較母藥有了大幅度的提高，但有一定量的綴合物會(huì)釋放出母藥，證明這種釋放是由體內(nèi)酶作用導(dǎo)致的。通過加巴噴丁偶聯(lián)膽酸，成功的延緩了它在體內(nèi)的降解速度，提高了口服利用度。

2）利用膽酸提高藥物靶向性：膽酸作為靶向藥物載體，可以提高藥物在肝及小腸的濃度，靶向投送藥物，降低藥物毒副作用。有機(jī)硝酸酯類是治療肝硬化的臨床用藥，但是在臨床應(yīng)用中有機(jī)硝酸酯類的一氧化氮釋放藥物門靜脈特異性差，經(jīng)常產(chǎn)生全身副作用。因而設(shè)計(jì)出了一種硝酸酯與肝靶向載體熊去氧膽酸的偶聯(lián)物 NCX1000：

隨后對(duì)偶聯(lián)物進(jìn)行了動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的測(cè)試，結(jié)果表明，新偶聯(lián)物具有很好的肝靶向性。在乙酰氨基酚誘導(dǎo)的肝損傷小鼠型中，NCX1000 使用使小鼠死亡率下降了一半。研究表明，NCX-1000 選擇性地被肝細(xì)胞所代謝，并且顯著升高肝內(nèi) NO 含量。目前 NCX1000 正處于Ⅱ期臨床研究階段。

3）利用膽酸提高藥物的細(xì)胞膜滲透性

VandanaS Pore 及其研究小組一直致力于利用膽酸雙極性分子的特點(diǎn)，獲得具有更好的細(xì)菌細(xì)胞膜滲透能力的抗菌類藥物。他們使用了效率更好的微波輔助 Cu( I) 催化環(huán)加成反映，分別在膽酸的 C-24 位，C-3 位連接了抗菌藥物氟康唑。新獲得的衍生物表現(xiàn)出良好的抗菌能力。隨后又在C-24 位( 羧基保留) 連擊酯鍵或者酰胺鍵后，利用微波輔助 Cu( I) 催化環(huán)加成反映連接了 β-內(nèi)酰胺類抗生素，抗菌活性測(cè)試表明，連接膽酸后較藥效團(tuán)活性大幅度增強(qiáng)，目前正在對(duì)藥物的細(xì)胞膜滲透性。

藥理作用 ^[3]

本品能刺激膽汁分泌，增加膽汁流，有利膽作用。

體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制^[4]

膽酸作為藥物投送載體的優(yōu)勢(shì)是肝腸循環(huán)效率高。藥物與膽酸偶聯(lián)后，由于可被膽酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白識(shí)別，參與進(jìn)膽酸的肝腸循環(huán)，從而提高藥物的吸收及在肝臟中的濃度。健康成人膽汁酸儲(chǔ)存量大約為 3 ～ 4 g，肝腸循環(huán)每天大約循環(huán) 6 ～ 15 次，除了循環(huán)中的損失，每天隨排泄物流出的膽酸少于 0． 5 g，體現(xiàn)了膽酸參與肝腸循環(huán)的大通量性及高效率。

在進(jìn)食后，膽酸隨膽汁由膽囊進(jìn)入小腸，然后大約 95% 的膽酸通過主動(dòng)運(yùn)輸和被動(dòng)運(yùn)輸被重新吸收，其中被動(dòng)運(yùn)輸發(fā)生于蜿蜒的小腸大部分區(qū)域，主動(dòng)運(yùn)輸發(fā)生于小腸末端的回腸部分。其中，主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)揮了主要的功能，在經(jīng)過回腸的重吸收后，膽酸通過門靜脈重新循環(huán)進(jìn)肝臟。有證據(jù)表明，藥物與膽酸 C-3 位偶聯(lián)后，提高了藥物在膽汁中的含量，參與了整體的肝腸循環(huán)。

肝腸循環(huán)的主要膽酸有甘氨膽酸(G-BA)、?；悄懰? T-BA)、硫酸鹽化膽酸( S-BA) 、葡(萄) 糖苷酸化的膽酸(U-BA)、具有額外羥基膽酸( H-BA)，其中雙陰離子型的甘氨膽酸和硫酸鹽化膽酸及具有額外羥基的膽酸在正常生理?xiàng)l件下很少，而在膽汁淤積等情況下會(huì)增多，需要MRP2、MRP3、MDR1 從肝臟中排出。參與膽酸肝腸循環(huán)的蛋白有小管內(nèi)膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白膽鹽輸出泵(BSEP)、多聯(lián)耐藥相關(guān)蛋白 2 (MRP2)、P 糖蛋白( MDR1)、鈉鹽依賴性膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(ASBT)、回腸脂質(zhì)結(jié)合蛋白(ILBP) 、異側(cè)運(yùn)載體OSTα /OSTβ、多連耐藥相關(guān)蛋白 3(MRP3)、Na + 牛磺膽酸協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NTCP) 。

其中，ASBT 將膽酸由小腸重新吸收進(jìn)入門靜脈血液，而 NTCP 將血液中的膽酸吸收進(jìn)入肝細(xì)胞，這兩種蛋白是轉(zhuǎn)運(yùn)膽酸的主要蛋白。有實(shí)驗(yàn)表明藥效集團(tuán)與膽酸的偶聯(lián)物可以被這兩種蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)，從而提高藥物被腸道和肝臟吸收的能力。

注意事項(xiàng)^[3]

用藥后可口苦。膽管完全梗阻者禁用。

制備^[5]

一種從豬膽膏或下腳料中直接提取合成鵝去氧膽酸或熊去氧膽酸制備方法。解決了現(xiàn)有工藝的不足，直接得到鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸。因而，本發(fā)明工藝 簡(jiǎn)單，成本低廉，適合應(yīng)用于臨床。 制備方法包括下述步驟： 

1）取豬膽膏(稱之豬膽膏經(jīng)皂化，提取豬去氧膽酸之后使用)，或下腳料(豬膽膏提取豬去氧膽酸之后為下腳料，含有鵝去氧膽酸較低在1535％范圍)50200kg為原料，直接預(yù)處理澄清去除非膽酸類雜質(zhì)。溶于1520倍堿水，加熱，加入1+1天然澄清劑(山東藥圣生物科技有限公司生產(chǎn))，1°/萬(wàn)10°/萬(wàn)，以母液計(jì)算。24小時(shí)，母液澄清，降溫，壓濾、去除非膽酸類雜質(zhì)，蛋白質(zhì)，粘液質(zhì)，外來雜質(zhì)、砂土、重金屬離子，有機(jī)殘留等，得澄清母液。降溫調(diào)ph34. 

2）將上述預(yù)處理的下腳料為原料，溶解于515倍量甲醇降溫010°，加入等克分子比的溴液，反應(yīng)610h之后，加入碳酸鈉510％水洗去除薄層層析中鵝去氧膽酸之下的雜質(zhì)膽酸。在堿性醇液中上強(qiáng)堿或弱堿性吸附樹脂去除未水洗干凈的溴酸鹽，次溴酸鹽等雜質(zhì)。得7酮基石膽酸，含有少量C3、C7雙酮化合物?；蛘?，用常規(guī)的鉻酸鹽氧化法氧化，之后，上強(qiáng)酸或弱酸性吸附樹脂去除未水洗干凈的重金屬離子。得7酮基石膽酸，含有少量C3、C7雙酮化合物。 

3）取上述7酮基石膽酸，加入硼氫化鈉、鉀等，還原，含氯甲烷或乙烷等有機(jī)溶劑去除薄層層析中鵝去氧膽酸之上的雜質(zhì)膽酸，制備。得到鵝去氧膽酸。或者，取上述7酮基石膽酸，加入金屬鉀鈉或雷石等，還原，含氯甲烷或乙烷等有機(jī)溶劑去除薄層層析中熊去氧膽酸之上雜質(zhì)膽酸，制備得到熊去氧膽酸。 

主要參考資料

[1] 化合物詞典

[2] 藥物的發(fā)現(xiàn)與發(fā)明史

[3] 臨床用藥速查手冊(cè)

[4] 趙騰飛, and 李慶勇. "膽酸作為藥物載體的研究進(jìn)展." Chinese Journal of New Drugs 22.9 (2013).

[5] CN201010530337.5 .從豬膽膏或下腳料中直接提取合成鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸的制備方法