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膠原蛋白的提取方法

2021/9/2 10:35:57

背景及概述[2-3]

膠原蛋白是一種生物高分子,是動(dòng)物結(jié)締組織的重要組成部分,對(duì)于維持細(xì)胞、組織和器官等的正常生理功能有著重要的作用。由于其具有良好的生物特性,膠原蛋白在食品、化妝品、生物學(xué)以及醫(yī)學(xué)等方面都有著廣泛的應(yīng)用。

膠原蛋白是什么膠原蛋白是一種生物高分子,是動(dòng)物結(jié)締組織中的主要成分,屬于動(dòng)物體內(nèi)的功能性蛋白,占體內(nèi)蛋白質(zhì)總量的25%~30%。膠原蛋白目前被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)材料、美容、食品以及飼料等領(lǐng)域。尤其是在美容領(lǐng)域,膠原蛋白具有阻止皮膚中的酪氨酸轉(zhuǎn)化為黑色素的功效,可以起到美容作用。注射用膠原蛋白可以做水光、面部填充以及淚溝填充等,具有較高的療效,并且副作用少。注射膠原蛋白可以增加肌膚活性,讓肌膚更加光澤。膠原蛋白注射治療過(guò)程通常只需20~40分鐘,安全性高,對(duì)人體無(wú)害。

豬膠原蛋白提取[1]

1 新鮮豬皮的處理

新鮮豬皮,刮去豬毛,去掉污物,60℃左右的熱水中洗滌3次,用刀去除皮下脂肪,將處理之后的豬皮切成 1×1cm 的條狀,4℃保存。每份豬皮稱量 5g,放入錐形瓶中待用。

2 樣品脫脂

脫 脂 液 配 制 :配 制 2.5%,5.0%,7.5%,10%,12.5% 的 脫 脂 液 ,分 別 稱 取 2.5g,5.0g,7.5g,10g,12.5g 的 Na2CO3,蒸 餾 水 溶 解 后 ,容 量 瓶 定 容 至100mL。脫脂時(shí),每份樣品加入 20mL的蒸餾水,再加入以上 5 種脫脂液,充分?jǐn)嚢?10min,過(guò)濾,按上述步驟再重復(fù)一次,清水漂洗兩次。每組實(shí)驗(yàn)做三組平行。

3 鹽處理

鹽溶液配制:取 2.25g NaCl,蒸餾水溶解,定容至250mL。樣品鹽處理?xiàng)l件參照藍(lán)蔚青實(shí)驗(yàn)方法。份豬皮加 8.3mL 等滲鹽水,放入恒溫水浴鍋內(nèi),在 60℃的條件下分別水浴 0.5h,1.0h,1.5h,2.0h,2.5h,期間不斷攪拌,使豬皮受熱均勻,用 40℃的蒸餾水漂洗兩次。每組實(shí)驗(yàn)做三組平行。

4 酸處理

樣品酸處理?xiàng)l件參照梁權(quán)實(shí)驗(yàn)方法。36%醋酸溶液:36.18mL冰醋酸,蒸餾水定容至100mL。NaHSO3溶液:4g NaHSO3溶解于 125mL 蒸餾水中。用 pH 計(jì)分別調(diào)配 pH 為 2.5,3.0,3.5,4.0,4.5 的醋酸緩沖液。分別用以上5種不同pH值的醋酸緩沖液8.3mL對(duì)豬皮進(jìn)行處理,放入60℃恒溫水浴鍋中水浴1.5h,期間不斷攪拌,使豬皮受熱均勻,用 40℃蒸餾水漂洗兩次。每組實(shí)驗(yàn)做三組平行。

5 凍干

將經(jīng)過(guò)處理的豬皮放入冰箱預(yù)冷凍3-4h,放入冷凍干燥機(jī)-80℃冷凍干燥 12 小時(shí)以上,取出。粉碎、稱重。

參考文獻(xiàn)

[1]林琳,牛一帆,史振霞,尚校蘭,路彥霞,高瑞寒,王碧柔.豬皮中膠原蛋白的提取[J].廊坊師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2020,20(01):58-61.

[2]魏春,劉春,劉心雨,張旭初,王歡.基因工程技術(shù)生產(chǎn)重組膠原蛋白的 研究進(jìn)展[J].發(fā)酵科技通訊,2021,50(01):1-5.

[3]廖茄利.膠原蛋白能美容抗衰嗎[J].家庭醫(yī)學(xué),2021(01):56.

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