背景[1-3]
Anti-NeuN(rabbit monoclonal),clone 27-4是以Anti-NeuN為抗原以兔為宿主制得的NeuN(rabbit monoclonal)抗體，可以特異性結(jié)合兔NeuN。
神經(jīng)元是大腦的基本信號組件。因此，一切嘗試從整體上了解大腦是如何工作的基本組成部分都要從研究功能不同的各類型神經(jīng)細胞開始。為此，免疫組化標記已逐漸成為神經(jīng)科學家最有價值的工具之一。利用各種細胞組分的抗體，研究者能夠識別表達神經(jīng)細胞表型的細胞，而且，就其形態(tài)特征和特定蛋白表達收集信息。
NeuN能夠識別脊椎動物神經(jīng)元特異的核蛋白單克隆抗體的產(chǎn)生。該蛋白被稱為神經(jīng)核（NeuN），能夠在成年小鼠中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的多數(shù)神經(jīng)細胞類型中檢測到。NeuN的出現(xiàn)暫時與神經(jīng)細胞退出細胞周期和/或終末分化開始一致。該蛋白質(zhì)在胚胎和成年神經(jīng)細胞中，除小腦浦肯野細胞、嗅球僧帽細胞、視網(wǎng)膜感光細胞、黑質(zhì)中的多巴胺能神經(jīng)元外的其他細胞中都能夠檢測到。
盡管NeuN的免疫組化檢測已經(jīng)被廣泛使用，其功能知道最近才被了解清楚。研究人員現(xiàn)在已經(jīng)能夠?qū)euN鑒定為Fox-3，F(xiàn)ox-3蛋白質(zhì)參與調(diào)控的mRNA剪接。由于Fox-3由神經(jīng)系統(tǒng)特異性表達，人們發(fā)現(xiàn)它在調(diào)節(jié)神經(jīng)細胞分化和神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中發(fā)揮作用
應用[4][5]
用于人胚胎脊髓發(fā)育中Nestin，NeuN，GFAP的表達變化及凋亡細胞的檢測研究
探討人胚胎脊髓發(fā)育過程中神經(jīng)干細胞、神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞的發(fā)育變化和規(guī)律以及細胞凋亡的變化。
[方法]采用免疫組織化學方法檢測神經(jīng)干細胞、神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞的標記蛋白Nestin,NeuN,GFAP在3w～8m人胚胎脊髓中的表達及變化;應用TUNEL法檢測3w～8m人胚胎脊髓中的原位凋亡細胞。
[結(jié)果]1.Nestin染色結(jié)果:Nestin在整個人胚胎脊髓發(fā)育過程中均可見到,3w即可在神經(jīng)管見到陽性細胞;5w～6w,陽性細胞在神經(jīng)上皮背側(cè)較腹側(cè)多,套層、邊緣層中陽性細胞開始出現(xiàn)并增多,脊神經(jīng)節(jié)內(nèi)可見陽性反應物;7w～8w,套層可見大量突起較長的陽性細胞(P＜0.05);10w～11w以后神經(jīng)上皮、灰白質(zhì)內(nèi)陽性細胞密度和強度均逐漸減少,中央管、白質(zhì)陽性細胞于3m、5m后趨于穩(wěn)定,灰質(zhì)內(nèi)可見少量有短突起的陽性細胞。
2.NeuN染色結(jié)果:NeuN陽性細胞在5w的套層中始見,數(shù)量少且染色淺,邊緣層未見NeuN陽性細胞;6w～7w,陽性細胞明顯增多,尤以基板為甚,脊神經(jīng)節(jié)內(nèi)也可見到陽性細胞;8w～9w,套層內(nèi)陽性細胞進一步增多(P＜0.05);10w,腹角內(nèi)陽性細胞有所減少,后根處始見少量陽性細胞;11w～3m,灰質(zhì)內(nèi)陽性細胞數(shù)明顯降低(P＜0.05),腹角見體積較大、胞核深染的運動神經(jīng)元;4m～6m,灰質(zhì)內(nèi)的陽性細胞數(shù)繼續(xù)減少(P＜0.05),后根處陽性細胞減少(P＜0.05);7m～8m,灰質(zhì)內(nèi)陽性細胞數(shù)量未有明顯變化。
參考文獻
[1]Long-term cultivation of multipotential neural stem cells from adult rat subependyma[J].Glenn T.Gobbel,Seung-Jin Choi,Steven Beier,Ajay Niranjan.Brain Research.2003(2)
[2]Neuroprotection of glial cell line‐derived neurotrophic factor in damaged spinal cords following contusive injury[J].HenrichCheng,Jey‐PeiWu,Shun‐FenTzeng.J.Neurosci.Res..2002(3)
[3]Ciliary Neurotrophic Factor Activates Spinal Cord Astrocytes,Stimulating Their Production and Release of Fibroblast Growth Factor-2,to Increase Motor Neuron Survival[J].Phillip J.Albrecht,John P.Dahl,Olivia K.Stoltzfus,Robert Levenson,Steven W.Levison.Experimental Neurology.2002(1)
[4]Neural stem cells and regulation of cell number[J].Lukas Sommer,Mahendra Rao.Progress in Neurobiology.2002(1)
[5]高燕.人胚胎脊髓發(fā)育中Nestin，NeuN，GFAP的表達變化及凋亡細胞的檢測[D].昆明醫(yī)學院,2008.