背景及概述[1-2]
鄰氯苯基乙二醇是一種有機中間體，可由2-氯苯乙烯在催化劑(S)-1-(2-羥基-1-苯乙基)硫脲修飾的Cr-Anderson型多酸的作用下用雙氧水氧化得到；或者由2-羥基鄰氯苯乙酮通過畢赤酵母Pichiasp.SIT2014細胞還原得到。
制備[1-2]
報道一、
在干凈的反應瓶中加入0.01mol 2-氯苯乙烯，再加入10ml混合溶劑(水和乙腈的摩爾比為1:1～3:1)，最后加入1.7g 30％過氧化氫和0.0216g(S)-1-(2-羥基-1-苯乙基)硫脲修飾的Cr-Anderson型多酸催化劑，反應24h，取5ml乙醇加入反應體系，離心使催化劑沉降，再加入3ml乙醇再次分離催化劑，過濾，得到催化劑，真空干燥。用乙酸乙酯將反應體系萃取3次，所得到的產(chǎn)品減壓除去溶劑，柱層析分離得到鄰二醇化合物，得到產(chǎn)品。產(chǎn)品的對映體過量由手性高效液相色譜測得，ee值達99％。
報道二、
步驟1、畢赤酵母菌Pichiasp.SIT2014菌體的培養(yǎng):
所用的斜面培養(yǎng)基，按每升計算，含葡萄糖15.0g，胰蛋白胨5.0g，酵母粉5.0g，KH2PO4 0.5g,K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，瓊脂20.0g，余量為水。
所用的種子培養(yǎng)基，按每升計算，含葡萄糖15.0g，胰蛋白胨5.0g，酵母粉5.0g，KH2PO4 0.5g,K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，余量為水。
所用發(fā)酵培養(yǎng)基，按每升計算，含葡萄糖15.0g，胰蛋白胨5.0g，酵母粉5.0g，KH2PO4 0.5g,K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，余量為水。
取4℃冰箱保存的畢赤酵母Pichiasp.SIT2014斜面菌種，挑取一環(huán)菌種接入到裝有15ml種子培養(yǎng)基的100ml搖瓶中，在搖床上控制溫度為30℃、轉(zhuǎn)速為180rpm進行種子培養(yǎng)18h，得到種子液；
然后按種子液：發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為5％的接種量，將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，在搖床上控制溫度為30℃、轉(zhuǎn)速為180rpm進行發(fā)酵培養(yǎng)24h，得到的發(fā)酵液離心，收獲的細胞即為畢赤酵母Pichiasp.SIT2014細胞。
最終所得的發(fā)酵液經(jīng)檢測，其產(chǎn)羰基還原酶活力約為20～30U/L，發(fā)酵液中細胞濃度按干重計算約4～5g/L，即單位細胞產(chǎn)羰基還原酶活力約為4-5U/g干細胞。由此表明，上述所得的畢赤酵母Pichiasp.SIT2014細胞對芳基羥基酮具有較強的還原性與選擇性。
步驟2、
將步驟1所得的畢赤酵母Pichiasp.SIT2014細胞置于緩沖液中；
所述的緩沖液為pH為6.5的磷酸鈉水溶液，其用量按畢赤酵母Pichiasp.SIT2014細胞干重：緩沖液為10g：1L的比例計算；
向上述所得的含有畢赤酵母Pichiasp.SIT2014細胞的緩沖液中加入2-羥基鄰氯苯乙酮，然后控制溫度為30℃、轉(zhuǎn)速為180r/min進行還原反應20h得到反應液；
上述反應所用2-羥基鄰氯苯乙酮的量，按畢赤酵母Pichiasp.SIT2014細胞干重：2-羥基鄰氯苯乙酮為0.5g：0.15mmol的比例計算；
將上述所得的反應液控制轉(zhuǎn)速為10000r/min進行離心分離，得到的上清液用等體積的乙酸乙酯萃取三次后，萃取液用無水硫酸鈉干燥，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，即得目標產(chǎn)物(S)-鄰氯苯乙二醇，轉(zhuǎn)化率為99.9％，ee值為99.2％。
參考文獻
[1][中國發(fā)明,中國發(fā)明授權]CN201610211338.0(S)-1-(2-羥基-1-苯乙基)硫脲修飾的Cr-Anderson型雜多酸催化劑、制備方法及其應用
[2][中國發(fā)明,中國發(fā)明授權]CN201410735876.0一種將消旋體芳基鄰二醇轉(zhuǎn)化為手性芳基鄰二醇的方法