背景[1-3]
2型補(bǔ)體受體抗體是一類可以特異性結(jié)合2型補(bǔ)體受體的多克隆抗體蛋白，主要用于需要檢測(cè)2型補(bǔ)體受體的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。Ⅱ型補(bǔ)體受體（CR2）按白細(xì)胞分化抗原歸類為CD21。CD2為分子量140kDa的單鏈糖蛋白，主要分布于B細(xì)胞、單核細(xì)胞、某些T細(xì)胞、咽上皮細(xì)胞及淋巴結(jié)濾泡樹突狀細(xì)胞上。
其配體C3bg、C3d和C3bi中的C3d部分。CR2也是EB病毒的受體，CR2與C3d結(jié)合的部位和同EB病毒結(jié)合的部位相距甚遠(yuǎn)。另外，最近報(bào)道CR2還可與IFN-α結(jié)合。CR2主要功能是對(duì)B細(xì)胞的分化、增殖、記憶和Ig產(chǎn)生起重要的調(diào)節(jié)作用。如B細(xì)胞表面交聯(lián)的C3d為B細(xì)胞由G1其進(jìn)入到S期提供了活化信號(hào)，可取代單核因子的作用，而可溶性C3d則可通過與CR2結(jié)合而阻止B細(xì)胞化分。帶有C3片段的IC可經(jīng)CR2定位于生發(fā)中心激活記憶性B細(xì)胞。另外，多克隆和單克隆CR2的F（ab`）2片段、C3bg-瓊脂糖和EB病毒都能通過與CR2結(jié)合而引起B(yǎng)細(xì)胞活化。應(yīng)用抗IgM抗體刺激B細(xì)胞可導(dǎo)致CR2磷酸化。而EB病毒則可借CR2感染B細(xì)胞（感染性單核細(xì)胞增多）或使B細(xì)胞或上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，引起伯基特淋巴瘤或鼻咽癌。CR2的基因定位于人第1號(hào)染色體上的長(zhǎng)臂32區(qū)，也屬于RCA家族成員。以cDNA探針的分子雜交研究表明，CR2與CR1的cDNA順序有高度的同源性（包括20個(gè)氨基酸的信號(hào)肽、954個(gè)氨基酸的胞膜外區(qū)，24個(gè)氨基酸的穿膜區(qū)和34個(gè)氨基酸的胞漿區(qū)），以致CR1的一些cDNA探針，也可同CR2基因雜交。氨基酸序列分析表明，CR2也具有與CR1同樣類型的SCR（15～16個(gè)）。
應(yīng)用[4][5]
用于人類腸道病毒71型與EB病毒疫苗候選抗原在畢赤酵母中的表達(dá)及免疫原性研究
甲基營養(yǎng)型畢赤酵母是目前應(yīng)用最為廣泛的外源蛋白表達(dá)系統(tǒng)之一,該表達(dá)系統(tǒng)具有產(chǎn)量高,操作簡(jiǎn)單,表達(dá)穩(wěn)定及成本低等優(yōu)點(diǎn)。畢赤酵母還具有蛋白翻譯后修飾加工系統(tǒng),非常適合作為真核生物蛋白的大規(guī)模生產(chǎn)平臺(tái)。本論文主要采用畢赤酵母系統(tǒng)表達(dá)人腸道病毒EV71和EB病毒(Epstein-Barr virus)疫苗候選抗原,并進(jìn)一步研究候選抗原的免疫原性。EV71是手足口病的主要致病原之一,能引起兒童患者嚴(yán)重神經(jīng)系統(tǒng)疾病甚至死亡。由于EV71感染性強(qiáng)且致病率高,EV71病毒已導(dǎo)致手足口病疫情多次爆發(fā)。然而目前仍缺乏有效的抗病毒藥物與預(yù)防疫苗。
研究表明EV71衣殼蛋白VP1具有較強(qiáng)的免疫原性：重組VP1能夠有效誘導(dǎo)中和抗體產(chǎn)生,并保護(hù)新生小鼠免于病毒致死性感染。因此VP1蛋白是具有潛力的EV71疫苗候選抗原。EBV是常見的感染人類B細(xì)胞的γ皰疹病毒,能在95%以上人群中進(jìn)行慢性潛伏感染。EBV是感染性單核細(xì)胞增多癥的致病原,能夠誘發(fā)淋巴及上皮腫瘤。EBV的致癌性使得EBV疫苗的研制工作尤為緊迫與必要。
目前EBV治療型疫苗研究主要集中于EBV核抗原1(EBNA1)上,而預(yù)防型疫苗則主要以EBV包膜蛋白gp350為研究重點(diǎn)。EBNA1是在所有EBV相關(guān)惡性腫瘤中唯一表達(dá)的病毒蛋白,并在EBV潛伏感染過程中具有重要作用。研究表明EBNA1特異T細(xì)胞能夠有效殺傷EBV陽性腫瘤細(xì)胞,因此EBNA1被認(rèn)為是EBV相關(guān)惡性腫瘤免疫治療的候選抗原。gp350在病毒感染過程中具有重要作用,gp350與B淋巴細(xì)胞表面2型補(bǔ)體受體(CR2)結(jié)合介導(dǎo)病毒進(jìn)入和感染靶細(xì)胞。大量研究表明gp350是中和抗體的首要靶標(biāo),為EBV預(yù)防型疫苗的首要候選抗原。
參考文獻(xiàn)
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