概述^[1] 

膜蛋白、核蛋白和胞質(zhì)蛋白抽提試劑盒用于從哺乳動(dòng)物組織和培養(yǎng)細(xì)胞中提取膜蛋白，核蛋白和胞質(zhì)蛋白，提取制備過(guò)程簡(jiǎn)便。制備的膜蛋白，核蛋 白和胞漿蛋白能保持天然活性，并且純度較高。提取的蛋白可用于進(jìn)一步的轉(zhuǎn)錄因子活性分析、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)(Gel Shift Assay)、 免疫共沉淀、Western Blotting和酶活性測(cè)定等后續(xù)蛋白質(zhì)研究，可以用于培養(yǎng)細(xì)胞或動(dòng)物組織中蛋白質(zhì)的提取。

特點(diǎn)^[1] 

1. 提取的蛋白限度地保持活性，可以用于Pull Down, EMSA, IP, Enzyme Activity Assay 等實(shí)驗(yàn)。

2. 內(nèi)含有的蛋白酶和磷酸酶抑制試劑可以避免蛋白質(zhì)的酶解和蛋白質(zhì)磷酸化狀況被破壞。

3. 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程只需要一個(gè)小時(shí)左右。無(wú)需要超速離心，可以并行處理多個(gè)樣本。

4. 既可以用于培養(yǎng)細(xì)胞（50x107個(gè)） ，有可以用于動(dòng)物組織（50×200 mg）蛋白質(zhì)的提取。

運(yùn)輸和保存條件^[1] 

常溫下運(yùn)輸，收到后將溶液B 2~8°C保存，DTT，溶液A, C 和蛋白酶抑制劑，PMSF 和磷酸酶抑制劑在-20°C的環(huán)境中 保存，保質(zhì)期兩年。

試劑盒組成

操作步驟^[1]

1. 對(duì)于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞，取培養(yǎng)細(xì)胞5×106~1×107個(gè)，棄去培養(yǎng)液，細(xì)胞用預(yù)冷的一倍PBS 洗滌兩遍；

2. 如果是組織樣本，將200 mg 組織剪切成小塊，加入適量的冰冷PBS洗滌兩次后，4°C離心700 g (3000 rpm)，3 min， 棄上清；

3. 將以上收集的細(xì)胞或組織中加入1000 μL預(yù)冷的溶液A（使用前每1 mL溶液A 加入1 μL DTT，10 μL PMSF，1 μL蛋白 酶抑制劑和5 μL磷酸酶抑制劑） ，置玻璃勻漿器冰上均質(zhì)30~50次，或 超聲破碎細(xì)胞，每次30 sec， 3~4次，每次間隔1 min， 置于冰上冷卻。均質(zhì)或超聲破碎細(xì)胞后應(yīng)鏡檢，細(xì)胞破碎率不小于90％。

主要參考文獻(xiàn)

[1] 李煥榕；三種核蛋白提取方法應(yīng)用于雙向電泳的比較。《浙江大學(xué)》