"SNU-761細胞：人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
TNC-1B12B4細胞系相關產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
LS-174T細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
C6661細胞系相關產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
FLS細胞系相關產(chǎn)品：Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
LC-1 sq細胞系相關產(chǎn)品：CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞
H-2023細胞系相關產(chǎn)品：Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
SJ-RH30細胞系相關產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
NCI-SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
AtT-20細胞系相關產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
PANC-02-03細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
C2-C12細胞系相關產(chǎn)品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
GC1-SPG細胞系相關產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
Tn 5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
Hs746T細胞系相關產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
SF 763細胞系相關產(chǎn)品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
SF 763細胞系相關產(chǎn)品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
SCC-9細胞系相關產(chǎn)品：Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
W256細胞系相關產(chǎn)品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
RMC細胞系相關產(chǎn)品：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
J-82細胞系相關產(chǎn)品：293EBNA細胞、MDA-175細胞、NCI-H2172細胞
OKT 3細胞系相關產(chǎn)品：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
0V-1063細胞系相關產(chǎn)品：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
HOP 62細胞系相關產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
DMS79細胞系相關產(chǎn)品：RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
HIT細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
Vero E-6細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
BV-173細胞系相關產(chǎn)品：Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞
GM16136細胞系相關產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
OCI-Ly 10細胞系相關產(chǎn)品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
COLO.205細胞系相關產(chǎn)品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞
CMT.64細胞系相關產(chǎn)品：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
LS513細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
C-28I2細胞系相關產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
KG-1a細胞系相關產(chǎn)品：HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
NCC-IT細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
MEC1細胞系相關產(chǎn)品：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞
SUM-102細胞系相關產(chǎn)品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
A375細胞系相關產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
RBMVEC細胞系相關產(chǎn)品：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞
KU812-F細胞系相關產(chǎn)品：639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞
MDA-134細胞系相關產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
870細胞系相關產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
MDA MB 453細胞系相關產(chǎn)品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
Panc 03.27細胞系相關產(chǎn)品：Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞
32D:cl3細胞系相關產(chǎn)品：Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
SJRH-30細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關產(chǎn)品：SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞
HO1N1細胞系相關產(chǎn)品：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
CAL851細胞系相關產(chǎn)品：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
CAL851細胞系相關產(chǎn)品：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
BE2C細胞系相關產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
Okayama University Medical School-27細胞系相關產(chǎn)品：EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞
EC9706細胞系相關產(chǎn)品：EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞
B-16細胞系相關產(chǎn)品：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞
BT-B細胞系相關產(chǎn)品：HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
ML2細胞系相關產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
MV-1-Lu細胞系相關產(chǎn)品：BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
GM17346細胞系相關產(chǎn)品：A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
PCI:SG231細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
McA-RH 7777細胞系相關產(chǎn)品：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
H-1915細胞系相關產(chǎn)品：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
NCTC-1469細胞系相關產(chǎn)品：COLO-357細胞、X63-AG 8.653細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
CD-18細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma F10細胞、H-157細胞、SUDHL-5細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、NK-92細胞、NCIH2591細胞
OE33細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、Microbiological Associates-104細胞、HuTu 80細胞
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