"SNU-761 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
rHSC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞、Panc327細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SNU-761 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYKnu細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞、DrG細(xì)胞
UMUC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
CL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
SNU-761 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/OHK細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞、SNU520細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞
SNU-761 Cell:人肝癌細(xì)胞系
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞
IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
RBL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞
CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
D341MD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞
H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞
HPC-Y5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131A細(xì)胞、H1694細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞
Reh細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA922細(xì)胞、BT-474細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞
H-2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞
MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
MDAMB175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV-29細(xì)胞、CT-26細(xì)胞、WM451細(xì)胞
U-373MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞
NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
Hs-578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞、H-2126細(xì)胞
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
BEL7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞
SNU-761 Cell:人肝癌細(xì)胞系
U251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞
A-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞
TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞
H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
tdott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞、U-2932細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞
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