"SNU-761 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! H-2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞、Reh細(xì)胞 TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞 GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 SNU-761 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞 GT38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞 Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞 SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞 OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 SNU-761 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞 HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞 H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞 KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞 H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞 MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞 Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 929細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞 NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞 H-2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf21細(xì)胞、KMB17細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞 SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞 SNU-761 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞 NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞 RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞 HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞 Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞 X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞 X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞 SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞 IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞 A-427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、SL-1細(xì)胞 HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞 LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞 MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞 RIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AKR細(xì)胞、H-2081細(xì)胞、H8細(xì)胞 RA-FLSs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞 NCI-H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞 B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞 BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞 MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞 MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞 hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞 PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞 Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞 SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞 OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞 B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞 SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞 MALME 3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A204細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞 SP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1095Sk細(xì)胞、SW 13細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞 16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞 COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞 Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞 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