單核細胞于血液白細胞中占比達 10%,其在機體發(fā)育、體內平衡維持以及免疫活動進程里均占據著極為關鍵的地位。身為專業(yè)的吞噬細胞類別,單核細胞能夠精準識別并有效吞噬各類病原體、受感染細胞、脂質成分以及細胞碎片等。與此同時,單核細胞還可通過獲取并呈遞抗原物質,向炎癥部位發(fā)生遷移并產生細胞因子等方式,有力推動整個免疫系統的應答反應。此外,髓樣細胞作為單核細胞的一種存在形式,能夠充當儲備庫,為巨噬細胞以及樹突狀細胞的特定子集提供補充來源。單核細胞生物學的深入研究,不但構成了透徹理解機體感染反應機制的根基,而且對于剖析炎癥所產生的長期效應而言同樣有著不可或缺的重要意義。
細胞表面標記物已然成為精準鑒定單核細胞及其獨特亞型的權威性手段。盡管單核細胞具備某些可觀測的形態(tài)學特征,像是呈現出不規(guī)則的外形、擁有細長的細胞核以及存在胞質囊泡等,但僅靠這些特征并不足以對其免疫細胞類型進行明確區(qū)分。而雙色流式細胞技術借助確定 CD14 和 CD16 作為識別三大主要人類單核細胞亞群的核心標志物,成功地為后續(xù)的標志物檢測工作筑牢了根基。
借助諸如轉錄組學、大規(guī)模細胞計數、功能測定以及單細胞分析等前沿技術手段,我們持續(xù)挖掘出更多的蛋白質標記物。這些全新的標記物猶如一把把鑰匙,為我們開啟了新的認知大門,使我們得以洞察潛在的疾病狀況、炎癥反應機制以及癌癥相關內涵等。本文著重對文獻中所提及的常見單核細胞標志物予以詳細闡述。
經典單核細胞:
在循環(huán)血液單核細胞里,“經典” 單核細胞占比約 80%至 90%。其在吞噬與抗菌活性、感知及免疫反應、細胞遷移等方面表現突出。這類單核細胞過氧化物酶活性較強,在產生活性氧(ROS)方面效率頗高,還能產生較多趨化因子受體,這使其具備向損傷和炎癥部位遷移的能力,并且可分化為巨噬細胞與樹突狀細胞。
在人類中,經典單核細胞的特征為高表達 CD14 且不表達 CD16(即 CD14++CD16 - )。CD14 作為細菌脂多糖的共受體,在單核細胞和巨噬細胞中特異性表達,而 CD16 是由 FCGR3A 和 FCGR3B 這兩個幾乎相同的基因所表達的抗體(IgG)受體,同時還伴有高水平的 CCR2、CCR5 和 CD62L。在小鼠體內與之對應的亞型,有時被稱作 “炎性單核細胞”,其由 Ly6C Hi CX3CR1 low CCR2+CD62L+CD43 Low 等標記組合來定義。
經典單核細胞的標志物抗體包括:CD14 抗體、Ly6C1 抗體、CCR5 抗體、CX3CR1 抗體、CD62L 抗體。
非經典單核細胞:
相較于經典單核細胞,非經典單核細胞子集在吞噬作用、ROS 產生以及促炎性細胞因子產生等方面均有所降低。它們并不執(zhí)行較為傳統的單核細胞功能,而是主要負責巡邏血管壁、促進傷口愈合以及應對病毒感染。該亞群的增殖情況與傳統單核細胞不同,其能在血液中循環(huán)更長時間,且起源于經典單核細胞。
人類的非經典單核細胞可憑借低水平的 CD14 與高水平的 CD16(有時表述為 CD14+CD16++ 或 CD14 CD16+)來加以識別。在此子集中還發(fā)現一些差異表達的蛋白質,如 CX3CR1、HLA - DR 以及會分泌 IL - 1β 和 TNFα。在小鼠中,該子集被稱為 “巡邏單核細胞”,Ly6C Low 是其主要區(qū)別標記,其他標記還有 CX3CR1 Hi CCR2 Low CD62L - CD43 + 和 TREML4+。
非經典單核細胞的標記抗體有:CD16 抗體、CX3CR1 抗體、CCR2 抗體、TREML4 抗體。
中間單核細胞:
現已鑒定出第三類亞群,即中間單核細胞。在人類中其表達 CD14 和 CD16(CD14++CD16+),在小鼠中則表達中間水平的 Ly6C。與經典單核細胞類似,該亞群也呈現出炎癥特性,但又如同非經典單核細胞,其過氧化物酶活性較低,且會分泌 TNF 和 IL - 1B。由于在諸如 HIV 等全身性感染患者中發(fā)現其水平升高,故而推測其在抗原呈遞和快速病原體防御方面發(fā)揮著重要作用。據報道,人類中間單核細胞表達標記 CCR2、CCR5、HLA - DR、CD86 和 CD11c,而中間 Ly6C int 小鼠可通過 CD209 和 MHCII 表達來識別。
中間單核細胞標志物抗體包括:CD14 抗體、Ly6C1 抗體、HLA - DR 抗體、CD86 抗體、CD11c 抗體。
FITC Rat anti-Mouse Ly-6C Antibody(HK1.4)
25T
PE Rat anti-Mouse Ly-6C Antibody(HK1.4)
25T
Pacific Blue Rat anti-Mouse Ly-6C Antibody(HK1.4)
25T
BV605 Rat Anti-Mouse Ly-6C(AL-21)
50ug
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