預(yù)吸附二抗是一種經(jīng)過(guò)特殊處理的二抗，其主要目的是為了降低二抗與細(xì)胞和組織樣品中的內(nèi)源性免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，從而提高實(shí)驗(yàn)的特異性和準(zhǔn)確性。預(yù)吸附處理，也稱為交叉吸附，是一種額外的純化步驟，通過(guò)利用具有潛在交叉反應(yīng)性的物種制備血清蛋白，使二抗混合物通過(guò)固定有這種血清蛋白的層析柱。在這個(gè)過(guò)程中，非特異性的二抗會(huì)被柱子吸附從而留在柱中，高特異性的二抗會(huì)從柱子中流穿從而被收集下來(lái)。
與普通二抗相比，預(yù)吸附二抗的主要區(qū)別在于其特異性和交叉反應(yīng)性。普通二抗沒(méi)有經(jīng)過(guò)預(yù)吸附處理，因此可能會(huì)與樣本中的內(nèi)源性免疫球蛋白或者多標(biāo)反應(yīng)中其他的一抗發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致非特異性的背景信號(hào)增強(qiáng)。而預(yù)吸附二抗由于經(jīng)過(guò)了額外的處理步驟，其特異性更高，非特異性結(jié)合更少，因此在進(jìn)行多色實(shí)驗(yàn)或者樣本中含有內(nèi)源性免疫球蛋白時(shí)，預(yù)吸附二抗是更理想的選擇。
預(yù)吸附二抗的應(yīng)用主要有兩種情況：一是當(dāng)樣本含有內(nèi)源性免疫球蛋白時(shí)，二是在進(jìn)行多色實(shí)驗(yàn)時(shí)，預(yù)吸附二抗可以最大程度地降低種屬交叉反應(yīng)性。此外，預(yù)吸附二抗還特別適合于單色、雙色或三色免疫組織化學(xué)（IHC）標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，因?yàn)樗鼈兛梢詼p少背景染色，提高信號(hào)的清晰度。
1、在做免疫組化或者免疫熒光時(shí)，如果一抗的宿主來(lái)源和樣本的種屬同源，比如樣本是大鼠組織，而一抗來(lái)源是小鼠，因?yàn)榇笫蠛托∈髮儆谕?，大鼠組織中內(nèi)源的IgG和一抗具有相似的序列，所以容易形成交叉污染。在選擇二抗時(shí)，最好是可以選擇排除大鼠干擾的預(yù)吸附二抗。
2、在免疫組化或者免疫熒光雙染時(shí)，為了防止兩個(gè)一抗還有樣本之間互相干擾，此時(shí)建議選擇預(yù)吸附二抗來(lái)降低非特異性干擾。
在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，選擇正確的二抗是非常重要的。預(yù)吸附二抗由于其高特異性，可以減少非特異性背景，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。Jackson為您提供近2000多種經(jīng)過(guò)多重測(cè)試的高品質(zhì)預(yù)吸附二抗，方便您的選擇和使用。
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