概述[1][2]
輔羧酶四水合物又名四水合硫胺焦磷酸酯，為維生素類藥，在體內(nèi)參與糖代謝中丙酮酸和a-酮戊二酸的氧化脫羧反應(yīng)，是糖類代謝所必需，缺乏時(shí)，氧化受阻形成丙酮酸，乳酸堆積，并影響機(jī)體能量供應(yīng)，其癥狀主要表現(xiàn)在神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和消化系統(tǒng)方面等。臨床上常用于腳氣病或Wernicke腦病的治療。亦可用于輔羧酶四水合物缺乏引起的周圍神經(jīng)炎、消化不良等的輔助治療。
結(jié)構(gòu)
制備[2]
一種高純度輔羧酶四水合物的制備方法：
1）稱量225.0g磷酸加入到反應(yīng)容器中，升溫至135℃，保溫?cái)嚢?小時(shí)?？刂茰囟?75℃以下，加入稱量好的175.0g五氧化二磷。待加入完畢以后，控制溫度在165℃至175℃保溫?cái)嚢?小時(shí)。然后降溫至130℃，保持該溫度，在2小時(shí)內(nèi)分批加入完100.0g維生素B1，并保持該溫度反應(yīng)。當(dāng)取反應(yīng)液用0.1mol/L的硝酸銀溶液檢測不再有白色渾濁現(xiàn)象時(shí)，停止攪拌。趁熱將所得黃色粘稠狀反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到正在攪拌的裝有0.5Kg冰水的反應(yīng)容器中(外加冷凍鹽水冷卻罐體，使物料溫度不超過10℃)，待形成透明溶液以后，將所得溶液再緩慢滴入到正在攪拌的裝有5.0L95％乙醇的除酸反應(yīng)容器中，滴加完后保持在0℃下靜置過夜。
2）將過夜后的產(chǎn)物混合液除去上清液，加入0.5L水將下層糖漿狀產(chǎn)物溶解后，加入到裝有2.5KgD315弱堿型陰離子樹脂交換柱中，用超純水淋洗。當(dāng)用1.0mol/L氫氧化鈉溶液檢測洗出液顯黃色時(shí)，開始接收洗出液，直至接收到1.0mol/L氫氧化鈉溶液檢測洗出液不顯黃色。一共接得約3.8L洗出液。接收完畢后先用1.0mol/L氫氧化鈉溶液，再用超純水再生該離子樹脂柱。
3）將以上所得3.8L洗出液，35℃減壓蒸餾至約0.5L。然后將該溶液加入到裝有2.5KgHZD-2型弱酸性陽離子樹脂交換柱中，先用超純水淋洗。當(dāng)用1.0mol/L氫氧化鈉溶液檢測洗出液，顯黃色時(shí)，開始接收洗出液。直至接收到1.0mol/L氫氧化鈉溶液檢測洗出液不顯黃色，共接到約5.5L洗出液。再改用10％HCl溶液淋洗，接收洗出液，同樣，直至接收到1.0mol/L氫氧化鈉溶液檢測洗出液不顯黃色，共接到約3.7L洗出液。然后用超純水再生該離子樹脂柱。
4）將經(jīng)陽離子樹脂交換過后所得到的5.5L溶液加入至結(jié)晶罐，35℃以下減壓蒸餾至約75ml，然后邊攪拌，邊慢慢滴加入375ml95％乙醇，有白色粉末析出。乙醇滴加完畢后，室溫下靜置3小時(shí)，然后減壓過濾，得濕產(chǎn)物粗品。25℃以下，真空度-0.098Mpa以上，烘至干燥失重小于0.2％結(jié)束，得到高純度輔羧酶四水合物29.7g，含量≥99.0％(HPLC)，總收率20.0％。
方法2：一種輔羧酶四水合物的制備方法，主要特征為焦磷酸與脫水劑在加熱條件下與維生素B1進(jìn)行反應(yīng)，得到輔羧酶四水合物。將60g焦磷酸加入到反應(yīng)器中，100℃攪拌1小時(shí)，加入20g維生素B1，再加熱到120℃反應(yīng)30分鐘使固體完全溶解，加入五氧化二磷20g，攪拌反應(yīng)至TLC檢測原料點(diǎn)完全消失(展開劑：甲醇∶水∶乙酸＝2∶1∶0.5)，加水、乙醇溶液沉淀得到大量類白色固體析出，過濾。檢測得到輔羧酶與維生素B1單磷酸酯、維生素B1三磷酸酯的混合物，取此混合物固體或溶于50ml純化水中按以上操作重復(fù)一次，將固體溶于100ml純化水中，2×100ml70％三辛胺甲基異丁基甲醇溶液萃取兩次，取水溶液，裝入100ml弱堿性陰離子交換樹脂(D301)柱中，純化水洗脫，將洗脫液直接引入1000ml強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂(732)中，純化水洗脫，紫外檢測洗脫液出現(xiàn)熒光時(shí)開始接收洗脫液，接收洗脫液至紫外檢測洗脫液沒有熒光時(shí)停止，洗脫液35℃減壓濃縮，干燥得類白色固體14.8g，HPLC檢測含量99.68％(按干品計(jì)算)，單個(gè)雜質(zhì)0.23％，總雜質(zhì)0.67％，水分15.04％，氯化物、游離磷酸指標(biāo)符合質(zhì)量要求，總收率45％。
應(yīng)用[3]
輔羧酶四水合物(CocarboxylaseTetrahydrate)為維生素類藥，又名四水合硫胺焦磷酸酯，在體內(nèi)參與糖代謝中丙酮酸和a-酮戊二酸的氧化脫羧反應(yīng)，是糖類代謝所必需，缺乏時(shí)，氧化受阻形成丙酮酸，乳酸堆積，并影響機(jī)體能量供應(yīng)，其癥狀主要表現(xiàn)在神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和消化系統(tǒng)方面等。臨床上常用于腳氣病或Wernicke腦病的治療，亦可用于輔羧酶四水合物缺乏引起的周圍神經(jīng)炎、消化不良等的輔助治療。
主要參考資料
[1]CN201010144966.4輔羧酶四水合物的新晶型及其制備方法
[2]CN200610052592.7一種高純度輔羧酶四水合物的制備方法
[3]CN201010144957.5一種輔羧酶四水合物的制備方法