簡介

FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的分子式為C22H25NO4，分子量為367.44，外觀為白色粉末。在室溫下，其具有一定的水溶解性，能夠在多種大極性溶劑中溶解。它的分子結(jié)構(gòu)中有一個甲基基團和L-亮氨酸的氨基酸殘基。其合成方法較多，在工業(yè)上易大劑量制備。

FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的性狀

合成方法

方法一：將3 N HCl/MeOH（1:1，10 mL）溶液加熱至70°C。在5分鐘內(nèi)滴加溶解在MeOH（5 mL）中的反應(yīng)物（2.36 g，4.16 mmol）。攪拌反應(yīng)混合物40分鐘。將反應(yīng)冷卻至室溫，真空濃縮并重新懸浮在10%碳酸鈉水溶液（25mL）中。加入EDTA二鈉鹽（3.09 g，8.31 mmol），在室溫下攪拌0.5小時。將反應(yīng)冷卻至0°C，加入溶解在丙酮（25 mL）中的Fmoc-OSu（1.54 g，4.57 mmol）溶液。將反應(yīng)物緩慢加熱至室溫并攪拌22小時。用EtOAc（50 mL）稀釋反應(yīng)物，用1 N HCl（3×50 mL）洗滌。用MgSO4干燥有機層，過濾并真空濃縮。通過快速色譜法（硅膠，1-5%甲醇在CH2Cl2梯度中）純化產(chǎn)物以獲得產(chǎn)物FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸[1]。

方法二：將Na2CO3（4當量）和Fmoc-OSu（1.2當量）加入到未受保護的粗α-甲基氨基酸在H2O/二惡烷（40 mL）中的溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物7天。每天使用HPLC-MS分析監(jiān)測反應(yīng)混合物。向反應(yīng)混合物中加入新鮮的Fmoc-Osu（0.5當量）。向反應(yīng)混合物中加水（100mL）。使用鹽酸水溶液將水層的pH值設(shè)置為2-4。用乙酸乙酯（3×100mL）萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機層。用MgSO4干燥有機層。在減壓下濃縮有機層。通過柱色譜法純化粗產(chǎn)物FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸[1]。

方法三：將濃鹽酸（10當量）加入烷基化（S），（R）-Ala-Ni（II）-（S）-2-[N-（N'-芐基脯氨基）氨基]二苯甲酮的甲醇溶液（40 mL）中。將反應(yīng)混合物在80°C下回流1小時。讓反應(yīng)混合物冷卻至室溫。真空濃縮反應(yīng)混合物。向反應(yīng)混合物中加入20mL水（20mL）。用DCM（3×20mL）提取水層。用鹽水洗滌合并的有機層。用MgSO4干燥有機層。在減壓下濃縮有機層。通過從丙酮溶液中沉淀成鹽酸鹽來純化產(chǎn)品FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸[2]。

參考文獻

[1]Cromm, Philipp M.; et al. Protease-Resistant and Cell-Permeable Double-Stapled Peptides Targeting the Rab8a GTPase. ACS Chemical Biology (2016), 11(8), 2375-2382

[2]McKinnie, Shaun M. K.; et al. Synthetic Modification within the "RPRL" Region of Apelin Peptides: Impact on Cardiovascular Activity and Stability to Neprilysin and Plasma Degradation. Journal of Medicinal Chemistry (2017), 60(14), 6408-6427.