簡介

隨著工業(yè)技術(shù)和科學(xué)研究的發(fā)展，制備FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸從最初的化學(xué)合成法到現(xiàn)在的生物催化法，實現(xiàn)了從高成本到低成本，高污染到低污染，高能耗到低能耗。其作為很多藥物合成的中間體，在生物領(lǐng)域、化工領(lǐng)域、醫(yī)藥領(lǐng)域等都具有十分重要的作用，因此對FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線的研究將一直作為熱門項目，吸引一批又一批的科學(xué)家及研究人員不斷探索、不斷創(chuàng)新[1]。

合成

圖1 FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線

將3 N HCl/MeOH（1:1，10 mL）溶液加熱至70°C。在5分鐘內(nèi)滴加溶解在MeOH（5 mL）中的反應(yīng)物（2.36 g，4.16 mmol）。攪拌反應(yīng)混合物40分鐘。將反應(yīng)物冷卻至室溫，真空濃縮，再懸浮于10%碳酸鈉水溶液（25mL）中。加入EDTA二鈉鹽（3.09克，8.31毫摩爾）并在室溫下攪拌0.5小時。將反應(yīng)冷卻至0°C，并加入溶解在丙酮（25 mL）中的Fmoc-OSu（1.54 g，4.57 mmol）溶液。將反應(yīng)緩慢加熱至室溫并攪拌22小時。用EtOAc（50mL）稀釋反應(yīng)物，并用1N HCl（3×50mL）洗滌。用MgSO4干燥有機(jī)層，過濾并真空濃縮。通過快速色譜法（硅膠，1-5%MeOH在CH2Cl2中的梯度）純化產(chǎn)物以獲得產(chǎn)物FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸。合成路線如圖1所示[2]。

圖2 FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線

將濃鹽酸（10當(dāng)量）加入烷基化的（S），（R）-Ala-Ni（II）-（S）-2-[N-（N’-芐基丙?；┌被鵠二苯甲酮在MeOH（40mL）中的溶液中。將反應(yīng)混合物在80°C下回流1小時。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫。在真空中濃縮反應(yīng)混合物。向反應(yīng)混合物中加入20mL水（20mL）。用DCM（3×20mL）提取水層。用鹽水沖洗合并的有機(jī)層。用MgSO4干燥有機(jī)層。在減壓下濃縮有機(jī)層。通過從丙酮溶液中以鹽酸鹽形式沉淀來純化產(chǎn)物。通過冷凍干燥干燥水層得到標(biāo)題化合物FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸。合成路線如圖2所示。

圖3 FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的合成路線

將鎳絡(luò)合物（3.20 g，6.25 mmol）和叔丁醇鉀（1.05 g，9.37 mmol）添加到RBF中，并在0°C和Ar氣氛下溶解在干燥的DMF（25 mL）中。將溶液攪拌3分鐘，然后加入1-碘-2-甲基丙烷（2.16 mL，18.7 mmol）。在0°C下攪拌反應(yīng)30分鐘，然后再加熱至室溫75分鐘。加入5%乙酸水溶液（100 mL）使反應(yīng)驟冷，然后用CH2Cl2（3×75 mL）萃取。用鹽水（2×75mL）洗滌合并的有機(jī)層。用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。通過快速色譜法純化非對映異構(gòu)體FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸（硅膠；EtOAc中的2.5%MeOH）。合成路線如圖3所示。

參考文獻(xiàn)

[1] 王浚哲,閆倩玉,徐皓然等. 大腸桿菌合成FMOC-Α-甲基-L-亮氨酸的代謝工程研究 [J]. 中國釀造, 2023, 42 (04): 46-52.

[2] Cromm, Philipp M.; et al. Protease-Resistant and Cell-Permeable Double-Stapled Peptides Targeting the Rab8a GTPase. ACS Chemical Biology (2016), 11(8), 2375-2382