背景及概述

五氟苯酚生物素酯又稱為d-生物素-O-PFP，是一種胺反應(yīng)生物素衍生物，可與抗生物素或鏈霉親和素高親和力結(jié)合。五氟苯酚酯在pH 7-9與胺基反應(yīng)形成穩(wěn)定的酰胺鍵。與其他胺反應(yīng)性官能團相比，五氟苯酚生物素酯具有更高的反應(yīng)性，但在水溶液中具有更好的穩(wěn)定性。五氟苯酚生物素酯不僅與伯胺基團反應(yīng)，還與仲胺反應(yīng)。

溶解性

五氟苯酚生物素酯溶于大部分有機溶劑，如：DCM、DMF、DMSO、THF等等，在水中有很好的溶解性。

處理和使用

五氟苯酚生物素酯取用時候需要注意溫差，空氣濕度，防止吸潮。在反應(yīng)中盡可能地處于惰性氣體保護中。

制備

生物素與抗生物素蛋白（或鏈霉抗生物素蛋白）綴合物之間的特異性結(jié)合親和力提供了將熒光染料，酶或EM標記物附著到生物分子上的特異性，五氟苯酚生物素酯為生物素化學(xué)修飾產(chǎn)物，通過五氟苯酚和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯，收率約98%；通過三氟乙酸五氟苯酯和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯，收率約95%[1]。

圖1 五氟苯酚生物素酯合成反應(yīng)式

五氟苯酚生物素酯合成

將1mmold-生物素，0.1mmol的N,N-二異丙基乙基胺，0.1mmol的1-羥基苯并三唑，1.2mmol苯酚溶于10ml二甲基甲酰胺中。向混合物中加入1.1mmolN,N'-二環(huán)己基碳二亞胺。在室溫下反應(yīng)進行反應(yīng)24小時，同時搖動。濾出混合物中出現(xiàn)的白色晶體。向溶液中加入10ml二氯甲烷以沉淀五氟苯酚生物素酯。用二氯甲烷洗滌沉淀物，并從甲醇：乙酸乙酯溶液中結(jié)晶。五氟苯酚生物素酯的產(chǎn)率為53％，熔點172-174℃，MW為410gr/mol。

應(yīng)用

五氟苯酚生物素酯是一種 PROTAC linker,屬于 alkyl/ether 類。可用于合成 PROTAC 分子。應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究，藥物釋放，納米技術(shù)和新材料研究，細胞培養(yǎng)，以及配體研究，多肽合成支持，接枝高分子化合物，新材料和聚乙二醇改性功能涂層等活性化合物方面。

參考文獻

[1] Korshun, Vladimir A.; Pestov, Nikolai B.; Nozhevnikova, Elena V.; Prokhorenko, Igor A.; Gontarev, Sergei V.; Berlin, Yuri A.Synthetic Communications, 1996 , vol. 26, # 13 p. 2531 - 2547