背景及概述^[1][2]

枸櫞酸噴托維林( pentoxyverine citrate) 的分子式: C20H31NO3·C6H8O7，分子量: 525.60。該藥具有中樞及外周性鎮(zhèn)咳作用，其鎮(zhèn)咳作用強(qiáng)度約為可待因的1/3。除對延髓的呼吸中樞有直接抑制作用外，還有輕度的阿托品樣作用，可使痙攣的支氣管平滑肌松弛，減低氣道阻力。適用于具有無痰干咳癥狀的疾病、急性支氣管炎、慢性支氣管炎及各種原因引起的咳嗽。

藥理作用^[1-2]

1.本品具有中樞及外周性鎮(zhèn)咳作用,其鎮(zhèn)咳作用強(qiáng)度約為可待因的l/3。除對延髓的呼吸中樞有直接的抑制作用外,還有輕度的阿托品樣作用?？墒汞d攣的支氣管平滑肌松弛,減低氣道阻力。

2. 對肝癌 HepG2 細(xì)胞增殖和凋亡的影響

2.1枸櫞酸噴托維林對肝癌 HepG2 細(xì)胞增殖和細(xì)胞形態(tài)的影響

HepG2 細(xì)胞分別在 60、75或90μmol /L 的枸櫞酸噴托維林中孵育 48 h 后，細(xì)胞以 MTT 處理后確定其存活率，并與對照組進(jìn)行比較。不同濃度的枸櫞酸噴托維林對人 HepG2細(xì)胞活力的細(xì)胞毒作用結(jié)果見圖1。枸櫞酸噴托維林以劑量依賴性的方式抑制 HepG2 細(xì)胞的活力。用60、75或90 μmol /L 的枸櫞酸噴托維林處理 HepG2 細(xì)胞48h 后，HepG2 細(xì)胞的明顯減少，分別由100% 降到 92%、68% 和 40%。HepG2 細(xì)胞經(jīng)75μmol /L 的枸櫞酸噴托維林處理 48 h 后，在倒置相差顯微鏡下觀察其形態(tài)，HepG2細(xì)胞數(shù)量明顯減少，出現(xiàn)細(xì)胞碎裂、體積減小或轉(zhuǎn)化為球狀結(jié)構(gòu)等變化，而在對照組中未觀察到這些變化，結(jié)果見圖 2。

2.2枸櫞酸噴托維林對肝癌 HepG2 細(xì)胞釋放乳酸

脫氫酶水平的影響進(jìn)行乳酸脫氫酶活性測定以明確抑制生長的效應(yīng)是否通過促進(jìn)細(xì)胞壞死所致。應(yīng)用75μmol/L的枸櫞酸噴托維林處理 HepG2 細(xì)胞 48 h 后，進(jìn)行LDH測定。對照組與化合物處理組之間LDH 活性比較無顯著性差異( P＞0.05)，提示75μmol /L的枸櫞酸噴托維林不是主要通過促進(jìn)HepG2 細(xì)胞壞死發(fā)揮抑制其增殖的作用。

2.3枸櫞酸噴托維林對 HepG2 細(xì)胞凋亡的影響

應(yīng)用 Hoechst 33258化合物染色檢測枸櫞酸噴托維林對 HepG2 細(xì)胞凋亡的影響。染色質(zhì)濃縮、DNA 斷裂、細(xì)胞皺縮和膜泡化是凋亡細(xì)胞的特征。細(xì)胞中濃縮的染色質(zhì)經(jīng)過 Hoechst 33258 染色后在熒光顯微鏡下觀察。與對照組比較，75μmol /L 的枸櫞酸噴托維林處理 HepG2 細(xì)胞48 h，可以顯著誘導(dǎo) HepG2 細(xì)胞凋亡( * P ＜0.05) 。

枸櫞酸噴托維林以劑量依賴的方式抑制 HepG2細(xì)胞的存活率。經(jīng)過枸櫞酸噴托維林處理的 HepG2細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)的變化，如細(xì)胞體積減小、碎裂或轉(zhuǎn)變?yōu)榍驙罱Y(jié)構(gòu)。LDH 活性檢測顯示對照組與化合物處理組之間無顯著性差異， 提示枸櫞酸噴托維林不是通過促進(jìn)細(xì)胞壞死而抑制 HepG2 細(xì)胞的增殖。

Hoechst 33258 檢測結(jié)果顯示枸櫞酸噴托維林可顯著誘導(dǎo) HepG2 細(xì)胞的凋亡。因此可推測枸櫞酸噴托維林是通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡的方式，發(fā)揮抑制人肝癌 HepG2細(xì)胞增殖的作用。目前所知細(xì)胞死亡的主要途徑為凋亡(apoptosis， APO) 、壞死( necrosis) 和自噬( autophagy)。壞死只發(fā)生在凋亡被阻斷的情況下，細(xì)胞在壞死過程中釋放 LDH。

枸櫞酸噴托維林的研究主要集中在用多種方法檢測多種劑型中的藥物含量，目前國內(nèi)外均未見其抗腫瘤研究報(bào)道。不良反應(yīng)和副作用使得現(xiàn)有抗癌藥物的使用受限，當(dāng)前治療肝癌藥物療效較差，同時(shí)抗藥作用問題也比較嚴(yán)重。因此有必要研制出對人體正常細(xì)胞增殖影響比較小、具有高度選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的抗腫瘤新藥。

臨床應(yīng)用和適應(yīng)癥^[2]

用于各種原因引起的干咳。

不良反應(yīng)^[2]

偶有便秘、輕度頭痛、頭暈、嗜睡、口干、惡心、腹脹、皮膚過敏等反應(yīng)。

藥物相互作用^[2]

如與其他藥物同時(shí)使用可能會發(fā)生藥物相互作用,詳情請咨詢醫(yī)師或藥師。

注意事項(xiàng)^[2]

1.本藥僅為對癥治療藥,如應(yīng)用7日癥狀無明顯好轉(zhuǎn),應(yīng)立即就醫(yī)。

2.服藥期間不得駕駛機(jī)、車、船、從事高空作業(yè)、機(jī)械作業(yè)及操作精密儀器。

3.老人、孕婦及哺乳期婦女應(yīng)在醫(yī)師指導(dǎo)下使用。

4.青光眼及心力衰竭患者慎用。5.本品無祛痰作用,痰多患者請?jiān)卺t(yī)師指導(dǎo)下使用。

6.對本品過敏者禁用,過敏體質(zhì)者慎用。

7.本品性狀發(fā)生改變時(shí)禁止使用。

8.請將本品放在兒童不能接觸的地方。

9.兒童必須在成人監(jiān)護(hù)下使用。

10.如正在使用其他藥品,使用本品前請咨詢醫(yī)師或藥師。

主要參考資料

[1]熊明濤,占勁松,朱吉生,邵金輝.噴托維林對肝癌HepG2細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J].生物技術(shù),2016,26(06):602-605.

[2] 枸櫞酸噴托維林片說明書