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MOUSE IL-2 ELISA KIT的應(yīng)用

2021/1/28 15:06:51

背景[1-3]

MOUSE IL-2 ELISA KIT采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗小鼠IL-2抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(zhǎng)參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。

白細(xì)胞介素-2是趨化因子家族的一種細(xì)胞因子。

它是由多細(xì)胞來源(主要由活化T細(xì)胞產(chǎn)生),又具有多向性作用的細(xì)胞因子(主要促進(jìn)淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化);對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用,能刺激已被特異性抗原或致絲裂因數(shù)啟動(dòng)的T細(xì)胞增殖;能活化T細(xì)胞,促進(jìn)細(xì)胞因子產(chǎn)生;刺激NK細(xì)胞增殖,增強(qiáng)NK殺傷活性及產(chǎn)生細(xì)胞因子,誘導(dǎo)LAK細(xì)胞產(chǎn)生;促進(jìn)B細(xì)胞增殖和分泌抗體;激活巨噬細(xì)胞。

白細(xì)胞介素是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。由于最初是由白細(xì)胞產(chǎn)生又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用,所以由此得名,現(xiàn)仍一直沿用。

最初指由白細(xì)胞產(chǎn)生又在白細(xì)胞間起調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子,現(xiàn)指一類分子結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能已基本明確,具有重要調(diào)節(jié)作用而統(tǒng)一命名的細(xì)胞因子,它和血細(xì)胞生長(zhǎng)因子同屬細(xì)胞因子。兩者相互協(xié)調(diào),相互作用,共同完成造血和免疫調(diào)節(jié)功能。白細(xì)胞介素在傳遞信息,激活與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞,介導(dǎo)T、B細(xì)胞活化、增殖與分化及在炎癥反應(yīng)中起重要作用。

應(yīng)用[4][5]

用于四首補(bǔ)益劑對(duì)衰老模型小鼠IL-2、IFN-γ、TGF-β影響的實(shí)驗(yàn)研究

通過觀察補(bǔ)益方劑對(duì)衰老機(jī)體免疫功能的影響,從實(shí)驗(yàn)的角度,探討補(bǔ)氣、補(bǔ)血、補(bǔ)陰、補(bǔ)陽(yáng)代表方劑在抗衰老免疫調(diào)節(jié)作用方面的差異性及側(cè)重點(diǎn),進(jìn)一步揭示出因虛(氣虛、血虛、陰虛、陽(yáng)虛)致衰的現(xiàn)代免疫學(xué)機(jī)制。

方法:立足于中醫(yī)補(bǔ)法提高機(jī)體免疫力延緩衰老的理論基礎(chǔ),選取四首經(jīng)典補(bǔ)益方劑四君子湯(補(bǔ)氣)、四物湯(補(bǔ)血)、六味地黃丸(補(bǔ)陰)、金匱腎氣丸(補(bǔ)陽(yáng)),以D-半乳糖致亞急性衰老模型小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,觀察四首補(bǔ)益方劑對(duì)D-半乳糖致亞急性衰老模型小鼠一般狀態(tài)、脾臟指數(shù)、免疫因子IL-2、IFN-γ、TGF-β水平的影響,并對(duì)其發(fā)生機(jī)制進(jìn)行探討。

結(jié)果:(1)與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組小鼠體重增長(zhǎng)率顯著下降(P<0.01);與模型對(duì)照組相比,各給藥組小鼠體重增長(zhǎng)率顯著升高(P<0.01);雄性小鼠以四君子湯組效果,雌性小鼠以四物湯組效果。

(2)與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組小鼠脾臟指數(shù)顯著下降(P<0.01);與模型對(duì)照組相比,各給藥組小鼠脾臟指數(shù)顯著升高(P<0.01),且各給藥組間無顯著差異。

(3)與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組小鼠IL-2水平顯著降低(P<0.01);與模型對(duì)照組相比,各給藥組小鼠免疫因子IL-2水平顯著升高;雄性小鼠以四君子湯組效果;雌性小鼠以四物湯組組效果。

參考文獻(xiàn)

[1]Age-Associated Endocrine Dysfunctions and Approaches to Their Correction[J].N.D.Goncharova,B.A.Lapin,V.Kh.Khavinson.Bulletin of Experimental Biology and Medicine.2002(5)

[2]Tailoring cancer vaccines to the elderly:the importance of suitable mouse models[J].Claudia Gravekamp.Mechanisms of Ageing and Development.2001(11)

[3]Impact of aging on stress-responsive neuroendocrine systems[J].Ward A Pedersen,Ruiqian Wan,Mark P Mattson.Mechanisms of Ageing and Development.2001(9)

[4]Bystanders or Bad Seeds?Many Autoimmune-target Cells May Be Transforming to Cancer and Signalling“Danger”to the Immune System[J].Brandon Philip Reines.Autoimmunity.2001(2)

[5]孫燕佩.四首補(bǔ)益劑對(duì)衰老模型小鼠IL-2、IFN-γ、TGF-β影響的實(shí)驗(yàn)研究[D].黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2012.

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