檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗小鼠 IL-2抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在的IL-2與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。
檢測(cè)類(lèi)型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測(cè)樣本類(lèi)型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗小鼠 IL-2檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說(shuō)明書(shū)一份。
靈敏度:3.5 pg/mL
檢測(cè)范圍:15.6 - 1,000 pg/mL
回收率范圍:84-107%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖
背景:
白細(xì)胞介素 2 (IL-2,也稱(chēng)為 TCGF) 是一個(gè) 15-16 kDa 單體α螺旋糖蛋白, 屬于 I 型細(xì)胞因子家族。 小鼠 IL-2 前體是含 169 個(gè)氨基酸(AA) 的多肽, 它包含一個(gè)由20 個(gè)氨基酸組成的信號(hào)序列和一個(gè)由 149 個(gè)氨基酸組成的成熟鏈。 另外還有一個(gè) O-連接糖基化的潛在位點(diǎn), 以及在 35-46 殘基處的多聚谷氨酰胺區(qū)。值得注意的是, 小鼠 IL-2有多個(gè)等位基因, 導(dǎo)致小鼠的 IL-2 序列(SwissProt#:P04351) 在 21-46 氨基酸處的谷氨酰胺數(shù)量及 TSSS 重復(fù)次數(shù)的不同。 成熟的小鼠 IL-2 氨基酸序列與人合大鼠的 IL-2分別有 56%和 73%的同源性, 主要差異位于聚谷氨酰胺區(qū)。 小鼠和人的 IL-2 存在一定交叉性。 在功能上, IL-2 最初被認(rèn)為是 T 細(xì)胞生長(zhǎng)因子, 因此, 被用于對(duì)癌癥和艾滋病患者的治療, 以及提高免疫反應(yīng)。 然而, 這些努力效果有限。 實(shí)驗(yàn)研究顯示,缺乏 IL-2 或 IL-2 受體的小鼠, 也可產(chǎn)生淋巴細(xì)胞增生和患自身免疫性疾病, 表明 IL-2是一個(gè)限制增長(zhǎng), 而不是誘導(dǎo)增長(zhǎng)的因子。 最近的研究表明, 淋巴細(xì)胞增生的真正原因是無(wú)法產(chǎn)生 CD4+FoxP3+CD25/IL-2Rα+ Treg 細(xì)胞。 值得注意的是, 現(xiàn)在IL-2 被認(rèn)為是成功誘導(dǎo) CD8+記憶細(xì)胞回憶應(yīng)答的必要條件。 總所周知, 表達(dá) IL-2的哺乳動(dòng)物細(xì)胞包括 CD4+和 CD8+T 細(xì)胞、 NK 細(xì)胞、 NKT 細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞。 IL-2受體很復(fù)雜, 由三個(gè)不同亞基組合而成。 其中兩個(gè)亞基可與配體結(jié)合,被稱(chēng)為 IL-2Rα和 IL-2Rβ。IL-2Rα為 55 kDa, 憑借低親和力與 IL-2 結(jié)合。IL-2β為 75 kDa,也是 IL-15 受體的組成部分,中等親和力與 IL-2 結(jié)合。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通過(guò) IL-2Rβ和一個(gè) 64kDa的共同γ鏈(γc) 來(lái)完成。 γc 與 IL-4, -7, -9, -15 和-21 共享受體。 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)γc 不與 IL-2結(jié)合, 但與 IL-2Rβ異源二聚體化, 形成一個(gè)功能性 IL-2 受體。 異源三聚體α-β-γc 受體可能與 IL-2 結(jié)合, 形成 Rα-Rβ復(fù)合體。
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