"MuM-2B Cell|人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞

細胞背景資料：脈絡(luò)膜黑色素瘤；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

CEMO-1細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞

HEK-293-FT細胞類似產(chǎn)品：：NP-69細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、D-407細胞

H157細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM C1細胞、SW 1353細胞、Vx2細胞

NCI-H920細胞類似產(chǎn)品：：HLEC-B3細胞、COLO 357細胞、HR1K細胞

Immortal Pig Intestinal-2I細胞類似產(chǎn)品：：HSC6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、J 82細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MuM-2B Cell|人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

HEK293S細胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞

SNU-251細胞類似產(chǎn)品：：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞

PE/CA-PJ34細胞類似產(chǎn)品：：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞

HFLS-RA細胞類似產(chǎn)品：：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HEK293S細胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞

SNU-251細胞類似產(chǎn)品：：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞

PE/CA-PJ34細胞類似產(chǎn)品：：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞

HFLS-RA細胞類似產(chǎn)品：：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系（cell line）指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。（由此便引申出了后來的有限細胞系（FiniteCellLine）、無限細胞系（InfiniteCellLine）），因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞（定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國際上美、英和日本等國已建有細胞庫；美國已有美國標準細胞庫或細胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細胞庫（HGMR）、細胞衰老細胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國也世界大的細胞庫。細胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，別是反復(fù)傳代的細胞，常需做如下說明：組織來源：細胞供體所屬物種，來自人體或者動物；個體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應(yīng)說明臨床和病理診斷，以及病歷號等。細胞生物學檢測：了解細胞一般和殊的生物學性狀，如細胞一般形態(tài)，異結(jié)構(gòu)，細胞生長曲線和分裂指數(shù)，倍增時間，接種率等。如為腫瘤細胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。培養(yǎng)條件和方法；應(yīng)說明細胞系（或株）適應(yīng)的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

NCI-H661細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞類似產(chǎn)品：：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞

HCC-1954BL細胞類似產(chǎn)品：：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞

SKG IIIa細胞類似產(chǎn)品：：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞

HEL-1細胞類似產(chǎn)品：：SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞

CCC-HSF-1細胞類似產(chǎn)品：：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞類似產(chǎn)品：：LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞

LN 382細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞

T24(ECV304)細胞類似產(chǎn)品：：Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞

MNNG細胞類似產(chǎn)品：：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞

MuM-2B Cell|人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞

MGHU1細胞類似產(chǎn)品：：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞

LSECs細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞

Ca759細胞類似產(chǎn)品：：130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞

RBL-1細胞類似產(chǎn)品：：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞

A2780/CP細胞類似產(chǎn)品：：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞

NCI-H1581細胞類似產(chǎn)品：：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞

NCI-H1581細胞類似產(chǎn)品：：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞

C17.2細胞類似產(chǎn)品：：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞

UCLA SO M14細胞類似產(chǎn)品：：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞

Co 205細胞類似產(chǎn)品：：Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞

SNK-1細胞類似產(chǎn)品：：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞

SKNBE(1)細胞類似產(chǎn)品：：WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞

CEMO-1細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞

U-87 MG細胞類似產(chǎn)品：：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞

HRGEC細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞

NCI-H441-4細胞類似產(chǎn)品：：H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞

UWB1289細胞類似產(chǎn)品：：A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞

OVCA432_Bast細胞類似產(chǎn)品：：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞

RASMC細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞

P31/Fujioka細胞類似產(chǎn)品：：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞

H-146細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞

Mo7e細胞類似產(chǎn)品：：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞

Sf21細胞類似產(chǎn)品：：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞

MOLM-14細胞類似產(chǎn)品：：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞

HDMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞

NTera2/D1細胞類似產(chǎn)品：：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞

GA10細胞類似產(chǎn)品：：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞

RS4-11細胞類似產(chǎn)品：：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞

PC 12細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞

MuM-2B Cell|人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞

NCI-HUT-460細胞類似產(chǎn)品：：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞

HSF2細胞類似產(chǎn)品：：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞

D-324MED細胞類似產(chǎn)品：：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞

LS1034細胞類似產(chǎn)品：：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞

NCI H345細胞類似產(chǎn)品：：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞

SKRC20細胞類似產(chǎn)品：：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞

GLC82細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞

HD11細胞類似產(chǎn)品：：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞

NCIH841細胞類似產(chǎn)品：：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞

UCD-MLA-144細胞類似產(chǎn)品：：SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞

Mel RM細胞類似產(chǎn)品：：MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞

Institute for Medical Research-90細胞類似產(chǎn)品：：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞

HCV 29細胞類似產(chǎn)品：：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞

HOC-1細胞類似產(chǎn)品：：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞

GM2219C細胞類似產(chǎn)品：：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞

GLC-82細胞類似產(chǎn)品：：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞

FLC-7細胞類似產(chǎn)品：：B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞

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