"CL1-0 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：肺癌；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴增(形成細(xì)胞株)，可以進行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

D283細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞

Jurkat細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pt-K1細(xì)胞、LL2細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞

OCI/AML-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC94細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞

SK-MEL-MeWo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SP2-0-Ag14細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞

SNU5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CL1-0 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

NK-10A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞

ACHN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞

293/EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞

H1944細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

NK-10A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞

ACHN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞

293/EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞

H1944細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

TE 85.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞

NCI-H1954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞

HEL92.1.7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLMEC細(xì)胞、MDA157細(xì)胞、GM05372細(xì)胞

MX-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞

SU-DHL-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-522細(xì)胞、SW 579細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞

G-292細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞

NCI-H1882細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOPC細(xì)胞、SEM細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞

MDA MB 231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞

SVEC 4-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞

Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞

CL1-0 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

LM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞

G361mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP 267細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞

NCI-HUT-69細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞

BCaP 37細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞

PNT-1A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV40 MES 13細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞

PNT-1A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV40 MES 13細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞

KRC Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞

RF/6A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞

IEC18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞

C33-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞

HT 144細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CNE1-LUC細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞、PC-9細(xì)胞

MonoMac 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞

DU-4475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞

Lu99A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞

ARH 77細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMUC-14細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞、HET1A細(xì)胞

P30OHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞

HEC1B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞

HLE-B3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞

HEK AD293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞

HEK 293 c18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞

EJ 138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞

HMO6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞

ID8/MOSEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞

Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞

Ku812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞

A375.S2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞

SAS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞

SF-539 BT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL1細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞、RMC細(xì)胞

CL1-0 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

Karpas 422細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞

BNL-CL.2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞

CII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞

HUT-125細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL-92_1_7細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞

H716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞

KATO III細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞

TMK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞

HSC5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞

HSC5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞

SJSA1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞

MCF-10 Attached細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞

DMS273細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

JTC-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞

L-5178-Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞

KNS-81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞

H-2228細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞

A-549細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞

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