"624-mel Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

H341細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞

PECAPJ34細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞

Panc-02細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UM-UC3細(xì)胞、MB231細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞

MDST8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2286細(xì)胞、H1341細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞

B16 F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-869細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

624-mel Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

NEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞

SACC-83細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞

SW837細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞

HPAF-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

NEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞

SACC-83細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞

SW837細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞

HPAF-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

SW-900細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞

Sp2/O-Ag14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞

NCIH1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞

MTC-TT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞

P3X63-Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞

SW403細(xì)胞類似產(chǎn)品：：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞

SuDHL 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞

OVCA432_Bast細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞

HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞

MILE SVEN1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞

624-mel Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

LICR-HN-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MB468細(xì)胞、38C-13細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞

CA46細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞

B6Tert-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞

P3J HR-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02219C細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞

343 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞

B10BR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞

B10BR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞

HRGEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞

GES-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞

MB-49細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞

MDA231-LM2-4175細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞

H2081細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hFOB細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞、CP70細(xì)胞

Tu 212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞

QBI-293A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞

HKC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞

CMT 167細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞

HCT-FET細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 50細(xì)胞、H3255細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞

HCC-1395細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞

3T3-L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞

REC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞

RSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞

JAR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SkChA-1細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞

PTK 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞

SNU119細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞

RDES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞

PC-3M-IE8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞

Metastatic Variant-522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞

UACC-893細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞

CORL51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞

624-mel Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

NCI-SNU-878細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞

C22細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞

38C-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞

LLC-MK-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-9細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞

UO31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞

ECC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞

SU8686細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞

IB-RS-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CNE細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞

OV3121細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞

D 407細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT 15細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞、ECC12細(xì)胞

SK BR 03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞

BC-009細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞

PC-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞

Keio University-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞

IGR-OV1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞

DMS-153細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞

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