"624-mel：人黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；男性
UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
624-mel：人黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
H-1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了，老化的會(huì)比較多，對后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
624-mel：人黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
細(xì)胞的凍存：目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
KYSE-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95-D細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
P3X63NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞、VP 267細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
VP229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞
H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞
HCCC9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞
HO-1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGLH7細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞
CAKI.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞、HGMC細(xì)胞
CAKI.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞、HGMC細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞
hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2157細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞
VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞
624-mel：人黑色素瘤傳代細(xì)胞
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H748細(xì)胞、TE-7細(xì)胞、H2342細(xì)胞
H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP 4細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、BSC1細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
MKN 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、T2細(xì)胞
C-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞
HMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞、KU.812細(xì)胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞、H-2087細(xì)胞
Cattle chondrocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178YR細(xì)胞、S37細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞
OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
Malme3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞
NRK-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞、PC9細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞
Hs-746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZAWA細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞
LYR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL6細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、HSC6細(xì)胞
R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞
HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞
A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞
ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
624-mel：人黑色素瘤傳代細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細(xì)胞、C12細(xì)胞、P19細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
KYSE-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 38細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、H1395細(xì)胞
PANC403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
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