"624-mel Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:黑色素瘤;男性 PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞 SUM 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞 LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞 MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 624-mel Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無(wú)法以其外觀分辨之;支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長(zhǎng)參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free,實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義;偵測(cè)出細(xì)胞株有支原體污染時(shí),該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細(xì)胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤(pán)如何保持清潔?定期(至少每?jī)芍芤淮? 以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會(huì)偏暗紅色,且pH值會(huì)越來(lái)越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會(huì)逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí),可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO2,以調(diào)整pH值;購(gòu)買(mǎi)之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購(gòu)買(mǎi)之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞 A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞 SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞 H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-50細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞 Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 624-mel Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞 YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞 WERIRb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞、Ly18細(xì)胞 MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞 BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞 Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞 KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞 624-mel Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細(xì)胞、NB4細(xì)胞、TE 671細(xì)胞 COLO680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HSF-1細(xì)胞、SNU182細(xì)胞、LS411N細(xì)胞 V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞 IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞 Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞 WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞 TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞 DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞 MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞 MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞 A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞 Huh 7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞 H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8402細(xì)胞、TE-10細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞 SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞 L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞 WERI Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY細(xì)胞、SW1116細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞 PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞 PC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIMVEC細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞 Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞 Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞 HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞 ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞 SUDHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞 RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞 MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞 IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞 G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞 NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞 J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞 PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞 OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞 A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞 H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞 SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞 H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞 COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞 H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞 OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞 H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞 HREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1672細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞 Calu 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞 624-mel Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 KATO 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞 MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞 D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞 NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞 BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞 PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞 SCLC21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞 QGY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞 COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞 KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞 RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞 HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、293GP細(xì)胞 "
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