蛋白酶K

英文名：Proteinase K

別名：Endopeptidase K; Prok; Protease K; Tritirachium album proteinase K

產(chǎn)品名稱：蛋白酶K

CAS 登錄號：39450-01-6

EINECS 登錄號：254-457-8

活性：>30U/mg

0。在組織或細(xì)胞核酸分離時(shí)，使核酸酶（RNA和DNA）以及反應(yīng)中其他酶失活

蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，從布氏白僵菌（Beauveria bassiana）中純化得到，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn)，它們離酶的活性中心有一定距離，與催化機(jī)理并無直接關(guān)系。然而，如果從該酶中除去ca2+，由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化，催化活性將喪失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。在較廣的pH范圍內(nèi)（pH 4-12.5）均有活性，在尿素和SDS中也較為穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力。

規(guī)格：100毫克普通裝或客戶定制

比活性值：38 U蛋白

來源種屬：酵母菌

分子質(zhì)量：28,650

（二）、產(chǎn)品檢測報(bào)告

1、稀釋緩沖液

根據(jù)需要，利用20mM Tris-HCL 緩沖液（PH 7.5）溶解成20mg/ml的工作濃度。

2、質(zhì)量說明

活性單位定義

37℃、PH7.5條件下，每分鐘可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量，定義為一個(gè)單位。

脫氧核糖核酸酶殘留

以λDNA為底物，37℃消化4小時(shí)以上，未檢測到脫氧核糖核酸酶活性。

核糖核酸酶殘留

37℃消化12小時(shí)以上，未檢測到核糖核酸酶活性。

3、酶純度測定（SDS-PAGE）

結(jié)果：蛋白酶K純度超過99.2%。

4、酶活性測定

蛋白酶K比活性值

比活性值（U）38

5、酶穩(wěn)定性測定（-20℃冷凍條件下，12個(gè)月的數(shù)據(jù)）

結(jié)果：干粉狀態(tài)正確儲(chǔ)存，一年內(nèi)酶活性保持不變；溶解狀態(tài)酶活性一年內(nèi)降低小于2%。

1、’動(dòng)物基因組提取（蛋白酶K濃度為20mg/ml）

不影響動(dòng)物基因組的有效提取√

與不加蛋白酶K的樣品相比，能有效降解蛋白質(zhì)√

2、降解蛋白質(zhì)能力

與15ug BSA 37℃孵育1小時(shí)，BSA可有效降解√

（四）、應(yīng)用范圍

  蛋白酶K的用途廣泛，主要的應(yīng)用行業(yè)包括：醫(yī)療及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域：基因診斷試劑盒；基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的核酸酶；此外，還應(yīng)用于：皮革工業(yè)（皮革軟化及精細(xì)化、脫毛和軟化、蠶絲脫膠）制備脈沖電泳的染色體DNA；提取組織中非蛋白成分時(shí)，降解含有蛋白質(zhì)雜質(zhì)；食品、釀造工業(yè)：肉類嫩化、酒類澄清；洗滌工業(yè)：酶洗衣粉、洗衣液等也有應(yīng)用。

（五）、貯存和使用

  干粉條件下有效期為24個(gè)月，液態(tài)時(shí)-20℃保存12個(gè)月?？蛻衾镁彌_液溶解后，需要-20℃貯存。溶解后，分裝成若干份，方便使用，避免反復(fù)凍溶。如果需要在2-8℃環(huán)境下放置，超過三天，建議過濾除菌或加入抑菌劑如3%疊danhuana，防止微生物污染。

  孵育溫度為55至65℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí)；理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。