"MDBK Cells|牛腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
Mhh-Call 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2-293細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞
QGP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
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細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí),1~2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),5~10℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí),可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過(guò)線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液(92%血清)2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量?jī)龃嬉?,用吸管吹打制成?xì)胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml)。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過(guò)3分鐘)。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
32Dcl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
LN-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:W256細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞、U-266細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
NCIH292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞、BRL細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞
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BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
H-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki2細(xì)胞、H1155細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞
NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞
KLN 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞
CHG5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞
PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞
Hepatoma 22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞
SW-1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ521細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞、C42細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞
H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞
NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
PAa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞
YH-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEp-2細(xì)胞、NT2細(xì)胞、SHEE細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
MCA 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
MDA-MB-134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML3細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
Lung cancer-1/squamous細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞
KTCTL-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞
H4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞
NCI H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
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RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM95細(xì)胞、LP1細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞
X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細(xì)胞、HUC細(xì)胞、CAMA細(xì)胞
HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2081細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、3-LL細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
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