"U-343MG Cells|人腦膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
U-343MG Cells|人腦膠質(zhì)瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
MRASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞
SNU761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
U-343MG Cells|人腦膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
KY180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
H-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細胞、MV4II細胞、P388細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
SK-N-BE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞
Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
CNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
U-343MG Cells|人腦膠質(zhì)瘤細胞系
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
SKMEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞
NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
CL MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
Pa14C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
NCI-H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
Hs688(A)T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
Hut292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
NPA-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
TJ905細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
KCL22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
VERO C 1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
WSUDLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞
MDA-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
U-343MG Cells|人腦膠質(zhì)瘤細胞系
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細胞、H.Ep. No. 2細胞、H2198細胞
H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細胞、SUM149PT細胞、Hs-578T細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、Lu99A細胞、L615細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細胞、NOZAWA細胞、WI 38細胞
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