"MDBK細(xì)胞：牛腎細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。

貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！

細(xì)胞傳代的一般方法：開(kāi)始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬(wàn)單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫(xiě)傳代記錄。

LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞

MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞

NCI-H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞、RSMC細(xì)胞

RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞

OK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細(xì)胞、C-8161細(xì)胞、KU 812細(xì)胞

Lung cancer-1/squamous細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞

OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞

KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞

OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞

U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細(xì)胞、N1S1細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞

OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞

J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞

SK-N-BE(2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞

HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞

Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞

Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞

TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞

SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞

McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞

MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞

SW 1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞

HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞

SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞

SK RC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞

32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞

ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞

OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞

H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞

HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞

HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞

SW 1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞

CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞

KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞

H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞

Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞

MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞

EL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞

Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞

SP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細(xì)胞、SW 13細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞

ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞

A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞

SUM-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞

MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞

NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞

L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞

KLM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細(xì)胞、KALS1細(xì)胞、MEL細(xì)胞

Line 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細(xì)胞、F442-A細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞

HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞

MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞

RPMI-1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞

MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞

HeLa-S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞

H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞

CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞

RPTEC/TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞

E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞

CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞

MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞

SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞

COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞

Panc203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCH細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞

HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞

Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞

J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞

SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞

Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞

PANC-08-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞

JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞

118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細(xì)胞、LK-2細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞

AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞

Leghorn Male Hepatoma細(xì)胞：細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞

NCI-H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞

SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞

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