"MA-104細胞：猴胎腎細胞系
細胞背景資料：胚腎；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞
Fetal Human Colon細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
Swiss 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
A-2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
RCK-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
KBM-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
HEp-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
WEHI 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
OV3121細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
Cates 1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP2細胞、67NR細胞、A549細胞
HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
RL95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
KTA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag 1.2.3細胞、Colon-38細胞、HOS細胞
HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
MDA-MB-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
SHI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
SK.OV.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
Y3.AG.1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞
NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞
HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細胞、CFPAC-1細胞、RD-ES細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、G-401細胞、ATDC5細胞
M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115細胞、CAL 78細胞、SUDHL-16細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細胞、GS9L細胞、H524細胞
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