"MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系
細胞背景資料：胚腎；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
Det 562細胞系相關產品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
P30-OHK細胞系相關產品：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
HEYA8細胞系相關產品：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
細胞生長：貼壁
MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結構，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LAD2細胞系相關產品：IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
MSB1細胞系相關產品：LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
BE2M17細胞系相關產品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
PTK1細胞系相關產品：UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞
NCI-H2405細胞系相關產品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HLEC-SRA 01/04細胞系相關產品：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
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Walker/LLC-WRC 256細胞系相關產品：GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
NCI-H2030細胞系相關產品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
H1666細胞系相關產品：Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
BRL 3A細胞系相關產品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
SK UT 1細胞系相關產品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
PK-136細胞系相關產品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
TE-7細胞系相關產品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
SNU-216細胞系相關產品：MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
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Y3.AG.1.2.3細胞系相關產品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
HOP92細胞系相關產品：MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
SW620細胞系相關產品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
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NK-92 MI細胞系相關產品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
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NTERA2細胞系相關產品：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞
Panc 3.27細胞系相關產品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
TOV-112D細胞系相關產品：ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
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BE2M17細胞系相關產品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
HEL92.1.7細胞系相關產品：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
KHYG1細胞系相關產品：no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞
MB49細胞系相關產品：HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
Hs819T細胞系相關產品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
NOK細胞系相關產品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
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TR 146細胞系相關產品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
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Hepatoma-22細胞系相關產品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
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NIE-115細胞系相關產品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
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COV 434細胞系相關產品：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
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Walker/LLC-WRC 256細胞系相關產品：GM05384細胞、SuDHL 10細胞、CAMA1細胞
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