"MA-104猴胎腎復蘇細胞(附STR鑒定報告)
細胞生長:貼壁
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類,化學污染和生物污染?;瘜W污染是一些對細胞有毒性的或對細胞產生刺激的化學物質。這些污染一般來自于沒有洗凈的器皿、不純的化學試劑和質量較差的蒸餾水等?;瘜W污染中比較引人注意的是細菌內毒素。它是革蘭氏陰性細菌細胞死亡后解體釋放出的疏水性的細胞壁組成物質,對塑料等疏水性強的物質有很強的吸附能力。細菌內毒素可刺激部分細胞產生一些激素或細胞因子,對細胞生長和實驗結果產生影響。細菌內毒素是臨床上的主要的熱原(即注射到動物體內會導致動物發(fā)熱),所以通過細胞培養(yǎng)生產的疫苗、細胞因子等用在臨床上的藥品的生產過程中更是要避免細菌內毒素的污染。
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
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養(yǎng)細胞真的不難,關鍵幾點:所有的東西使用的,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞。動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越HAO。另外,要掌握HAO胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因。有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措。要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,細胞房的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗。個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟。細胞房不能進去太多人,避免相互干擾。
細胞背景資料:胚腎;自發(fā)永生
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MA-104猴胎腎復蘇細胞(附STR鑒定報告)
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
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細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
傳代細胞時,使用無菌技術和合適的試劑及設備尤為重要。針對您的細胞系選擇合適的培養(yǎng)液來得到佳的生長和擴增很關鍵。每一個細胞系都有定的生長營養(yǎng)組分配方,但是大多數(shù)細胞系起碼需要的添加物有以下這些:血清,如胎牛血清,需熱處理滅活其胎牛成分,它為細胞生長提供重要的生長因子。抗生素,如青霉素和鏈霉素用于防止細胞污染。其他的生長因子,如成纖維細胞生長因子,有助于延長細胞系的生長和擴增。不使用時,要將這些添加物或者“完全”細胞培養(yǎng)液保存于4攝氏度。首先要注意細胞培養(yǎng)液的顏色,富含營養(yǎng)的新鮮培養(yǎng)液由于添加了pH指示劑酚紅故為透明橙色。當細胞耗盡培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分時,開始在培養(yǎng)物中積累廢物和酸性物質,降低pH值。因此,許多細胞培養(yǎng)液含有酚紅,當培養(yǎng)物呈酸性時會將培養(yǎng)液顏色由橙色變?yōu)辄S色。培養(yǎng)液需在變黃之前更換。當酚紅變?yōu)榉奂t色時,說明培養(yǎng)基pH偏堿,不利于細胞健康生長。這時可能需要改變二氧化碳濃度并更換培養(yǎng)液。很多貼壁細胞系可天然附著于無涂層的塑料上。因此,塑料細胞培養(yǎng)板如培養(yǎng)皿或六孔板經常用于傳代細胞。塑料的細胞培養(yǎng)瓶也經常用到,如T25的細胞培養(yǎng)瓶,常用于擴增培養(yǎng)數(shù)目少的細胞或者開始培養(yǎng)生長緩慢的細胞系。T75細胞培養(yǎng)瓶常用在培養(yǎng)擴增速度較快的細胞系或用于生長超過T25培養(yǎng)瓶容量的大量細胞。在轉移貼壁細胞時,要先剪切掉細胞上與和塑料結合的蛋白。因此,消化酶胰酶常用于消化細胞??刂埔让赶臅r間很重要,因為如果處理時間過長會損壞細胞表面的蛋白。細胞培養(yǎng)液能中和胰酶。所以在胰酶消化前常用磷酸緩沖液或PBS洗滌細胞。EDTA,一種鈣螯合劑有時候也用于提GAO胰酶的蛋白水解功能。為擴增細胞克隆,將新鮮傳代的細胞培養(yǎng)于細胞培養(yǎng)箱中,選擇適合該細胞生長條件,通常為溫度37度,二氧化碳5%和濕度95%。
細胞生長特性:貼壁
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關鍵字: MA-104猴胎腎復蘇細胞(附STR鑒定;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。