"NCI-H157細胞：人非小細胞肺腺癌細胞系

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

細胞生長特性：貼壁生長　

培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。

細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。

細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。

Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞

Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞

H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞

SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞

SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞

Eph4 1424細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDMEC細胞、RBMVEC細胞、LC-2-Ad細胞

Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞

BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞

MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞

HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞

Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞

MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞

MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞

PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞

EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞

AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞

AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞

CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞

RPMI 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞

OACP4 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞

RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞

GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞

HCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞

7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞

M059J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞

H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞

H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞

ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞

HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞

2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞

ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞

ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞

SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞

TGBC-11-TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞

HCT-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞

BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞

NCI-H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞

GM04154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞

639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞

LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞

NCI-H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞

Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞

OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞

OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞

SUM-159-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞

PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞

FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞

TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞

NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞

OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞

MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞

H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞

HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞

RWPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞

H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞

CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞

H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞

HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞

COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞

MSCs（mUCMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞

SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞

Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞

184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞

S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞

hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞

Vero from pool #76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞

NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞

U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞

NCI-H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞

P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細胞、Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞、SNU216細胞

P31 FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB453細胞、NCI-H1693細胞、T-HSC細胞

H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、SK-MES細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞

BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細胞、138 MG細胞、Hs 611.T細胞

"