"NCI-H157 Adherent人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H157 Adherent人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H157 Adherent人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
U266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
SL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞
Super Tube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞
NCI-H157 Adherent人非小細胞肺腺癌細胞系
GM00637B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
NeHepLxHT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
OC 316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞
RCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
J-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293EBNA細胞、MDA-175細胞、NCI-H2172細胞
TMD-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
RPMI.8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
UCLA RO-81A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞
INS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞
MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
H766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞
OSC-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
Colon38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
Fao細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
EMT-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞
1E8-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
IMR-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
NCI-H157 Adherent人非小細胞肺腺癌細胞系
UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
LUDLU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
MDA-MB 468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1ME A.7R.1細胞、U-226AR1細胞、32D/cl3細胞
KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細胞、CCC-HHM-2細胞、HLF細胞
H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、SKMEL5細胞、MDA-MB-453細胞
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