"Lu-65細胞：人大細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：１０傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
HEC-151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
SHP77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
H4-II-EC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
hTERT-HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial細胞：-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
SUDHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞
GA-10 (Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
MOLT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
OCI-LY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
Tca-8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
ReNcell CX細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細胞、U251MG細胞、P3-x63-Ag8 653細胞
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
HEY-A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
Mahlavu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
F81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
CAL-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細胞、MES-13細胞、EA.Hy926細胞
Ra #1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細胞、MiaPaca.2細胞、SCL-II細胞
H647ell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、L6細胞、HEK-293細胞
HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、639-V細胞、Capan2細胞
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