"SK-MEL-28細(xì)胞：人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：８?jìng)鞔?，?３天換液１次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類(lèi)，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類(lèi)培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
MRMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞、CORL88細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞
A 375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞
MHCC 97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26 WT細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞、Colon38細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
NRCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細(xì)胞、8505C細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞
FL62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞
PANC1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2198細(xì)胞、N-87細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞
NG-108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CL11細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial細(xì)胞：-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
MGHU3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細(xì)胞、WM-115細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
PANC0504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細(xì)胞、HIT細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
NCI-H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMDC細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞、M619細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
CAL-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞
X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
Human Lung Microvascular Endothelial細(xì)胞：-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、Ca761細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
H4IIEC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞
Hs 675.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PanC1細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞、NHEK細(xì)胞
HCC0366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
RCC10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞
NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞
H-1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-1細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞
BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞
INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞
HARA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCCT1細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、1301細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細(xì)胞、H2073細(xì)胞、BCP1細(xì)胞
TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、KMS18細(xì)胞
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