"SK-MEL-28 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 32D/cl3細胞系相關產品:H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞 HTR8svn細胞系相關產品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞 H295R-S1細胞系相關產品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞 細胞生長:貼壁 SK-MEL-28 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:3-1:8傳代,2-3天換液1次。 DSL-6A/C1細胞系相關產品:OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞 SGC-7901/DDP細胞系相關產品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞 Ramos (RA 1)細胞系相關產品:hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞 HCC-70細胞系相關產品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞 THP1細胞系相關產品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SK-MEL-28 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:星形的 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 293T/17細胞系相關產品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞 A10細胞系相關產品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞 H-929細胞系相關產品:C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞 SU-DHL-16細胞系相關產品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞 HEC-1A細胞系相關產品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞 SF 295細胞系相關產品:MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞 WM 2664細胞系相關產品:TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞 293細胞系相關產品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞 HOPC細胞系相關產品:UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞 HNEpC細胞系相關產品:Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞 SK-MEL-28 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 COLO679細胞系相關產品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞 TC-1[JHU-1]細胞系相關產品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞 GDM-1細胞系相關產品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞 SW-1463細胞系相關產品:HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞 F98細胞系相關產品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞 F81細胞系相關產品:UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞 A498細胞系相關產品:H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞 NCI-H1648細胞系相關產品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞 KPL-1細胞系相關產品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞 NCI747細胞系相關產品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞 SK-N-SH細胞系相關產品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞 BN-CL2細胞系相關產品:SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞 HCCC9810細胞系相關產品:Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞 SCLC-21H細胞系相關產品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞 A172細胞系相關產品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞 H-2286細胞系相關產品:WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞 SKO-007細胞系相關產品:HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞 HCT_116細胞系相關產品:RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞 ketr 3細胞系相關產品:HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞 OEC19細胞系相關產品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞 C32 [Human melanoma]細胞系相關產品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞 253J-Bladder-V細胞系相關產品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞 GM15452細胞系相關產品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞 ECC 12細胞系相關產品:GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞 NCI-H460細胞系相關產品:SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞 EL 4細胞系相關產品:L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞 MUTZ3細胞系相關產品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞 Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關產品:OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞 KYSE 510細胞系相關產品:NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞 C17.2細胞系相關產品:U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞 NCI-SNU-407細胞系相關產品:CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞 NCI-SNU-387細胞系相關產品:Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞 LS513細胞系相關產品:OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞 KATOIII細胞系相關產品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞 BHK-21細胞系相關產品:QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞 SCL-2細胞系相關產品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞 BTI-TN5B1-4細胞系相關產品:HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞 MIA PaCa-2細胞系相關產品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞 T. T細胞系相關產品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞 RS4:11細胞系相關產品:PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞 ATDC5細胞系相關產品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞 H-2444細胞系相關產品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞 OCI-AML-2細胞系相關產品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞 NR8383.1細胞系相關產品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞 Balb/c 3T3細胞系相關產品:ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞 GM05372E細胞系相關產品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞 SU-DHL-1細胞系相關產品:DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞 COLO-357細胞系相關產品:SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞 Lieming Xu-2細胞系相關產品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞 SF295細胞系相關產品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞 H1618細胞系相關產品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞 SK-MEL-28 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 H-711細胞系相關產品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞 LoVo細胞系相關產品:KYSE 270細胞、MFE 296細胞、SK-MEL-2細胞 COLO-16細胞系相關產品:OUMS27細胞、MKN-45細胞、P815細胞 H929細胞系相關產品:639 V細胞、NCIH187細胞、BCPAP細胞 "
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