"B16-F1細胞：小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞凍存知識普及：細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-１９６℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度５%.１５%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結條件下，細胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-１到-２℃/min，當溫度低于-２５℃時可加速，到-８０℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-１９６℃)。
MZ-CRC-1細胞系相關產(chǎn)品：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
HCC-2218細胞系相關產(chǎn)品：WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
NGP細胞系相關產(chǎn)品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
SUIT-2細胞系相關產(chǎn)品：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
OVCA 420細胞系相關產(chǎn)品：IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
DHL-4細胞系相關產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關產(chǎn)品：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
PMVEC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
Hep II細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
Line 207細胞系相關產(chǎn)品：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞
NCI-H510細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
H-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
D-283細胞系相關產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產(chǎn)品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
SCC-15細胞系相關產(chǎn)品：MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞
CAL-51細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
Ha Fe細胞系相關產(chǎn)品：HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
HEC1B細胞系相關產(chǎn)品：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
Rat podocyte細胞系相關產(chǎn)品：WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
MT-2J細胞系相關產(chǎn)品：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
H4-IIE-C3細胞系相關產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
PNT1/A細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
BERH-2細胞系相關產(chǎn)品：MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
C-28I2細胞系相關產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
MC26細胞系相關產(chǎn)品：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
Rat-2細胞系相關產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
16HBEo-細胞系相關產(chǎn)品：NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
IPEC-1細胞系相關產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
M20 [Human melanoma]細胞系相關產(chǎn)品：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞
EBTr細胞系相關產(chǎn)品：RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
WiDr/S細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
HEK-293FT細胞系相關產(chǎn)品：B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
CF-PAC1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
C32-mel細胞系相關產(chǎn)品：GLAG-66細胞、huH 1細胞、WEHI-279細胞
NCIH211細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
NCI-H735細胞系相關產(chǎn)品：OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞
Hs 695T細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
SUDHL16細胞系相關產(chǎn)品：NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
COLO 738細胞系相關產(chǎn)品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
BIU-87/Adr細胞系相關產(chǎn)品：OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞
GLC-15細胞系相關產(chǎn)品：LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
Panc-813細胞系相關產(chǎn)品：IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
P-3J細胞系相關產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
32D-Cl3細胞系相關產(chǎn)品：FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
YT細胞系相關產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
DMS 114細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
NCTC 1469細胞系相關產(chǎn)品：WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞
NPA細胞系相關產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
J82COT細胞系相關產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
NR-8383細胞系相關產(chǎn)品：SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
KNS81細胞系相關產(chǎn)品：3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
QSG7701細胞系相關產(chǎn)品：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
CMT-167細胞系相關產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
Oregon J-111細胞系相關產(chǎn)品：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
OPM-2細胞系相關產(chǎn)品：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
NCI-H2106細胞系相關產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
BMSCs（mBMSCs）細胞系相關產(chǎn)品：U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
MPC5細胞系相關產(chǎn)品：COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
BHP 10-3細胞系相關產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
Pan02細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關產(chǎn)品：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
PC-3M 2B4細胞系相關產(chǎn)品：KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
CG-4細胞系相關產(chǎn)品：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
HASMC細胞系相關產(chǎn)品：HOS TE 85細胞、OCIAML3細胞、CZ-1細胞
H-2030細胞系相關產(chǎn)品：OCIAML4細胞、COLO-680N細胞、Helacyton gartleri細胞
HCC2218細胞系相關產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、DrG細胞、ROS17/28細胞
PC12(高分化)細胞系相關產(chǎn)品：KBM5細胞、VP 267細胞、LS-513細胞
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