"B16-F10細胞：小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：B１６-F１０是B１６-F０的亞系。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
OCI-LY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
KRC/Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
C17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞
P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
SK-RC 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
SK-RC 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
16-HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
MRCV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞
NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
Vero-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
MCF 7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
NCI-H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
KNS81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
PLC-PRF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
PaTu8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
SK-MEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
PANC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma細胞：細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞
LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細胞、NCI-H1395細胞、SHI1細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細胞、Hs-343-T細胞、NCIH929細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、MM.1S細胞、NIH 3T6細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細胞、C2C12細胞、U-251 MG細胞
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